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第十一章 稳定核素技术 第一节 概 述 稳定核素分析技术是进行生命科学研究和临床研究一项十分重要的技术。早在放射性同位素广泛应用之前，稳定核素就被用来进行有关生命科学的研究。随着稳定核素定量检测技术的飞速发展，特别是气相色谱-质谱联用仪、液相色谱-质谱联用仪和在核磁共振谱仪中采用了傅里叶变换技术，大大提高了测量的灵敏度和精确度，并可分析分子结构；加之稳定核素的产量增加和成本下降，以及人们对放射性危害的关切，使得稳定核素的应用迅速发展。 一、稳定核素测定的特点 与放射性核素相比，应用稳定核素有其特殊的优点：①没有辐射危害，因而适宜于体内示踪，尤其是孕妇及儿童；使用时不需采用特殊的防护措施。②稳定核素标记的化合物不会发生辐射自分解，核素也不会衰变，因而不受时间限制，并且适用于长过程的示踪。③稳定核素一般没有化学毒性，如常用的13C、15N、18O，安全可靠。④有些核素如氮和氧没有半衰期足够长的放射性核素，稳定核素是唯一可用的示踪物。⑤用有机质谱仪和核磁共振谱仪分析时，可以观察到示踪物的分子结构及示踪原子标记位置，而使用放射性核素，则需通过复杂的化学降解及降解产物的分离才能确定。⑥可与放射性核素双重标记示踪来弥补放射性核素单标记的不足。 二、常用的几个基本概念 核素（nuclide）是指具有特定核特征的某一种原子，泛指原子序数、原子量（或叫质量数）和核能态不同的原子形式，核素分为稳定核素(stable nuclide)和放射性核素(radionuclide)两类。 同位素(isotope)是指原子含有相同的质子数，不同的中子数，而致质量数不同但原子序数相同，在元素周期表上占相同位置的化学性质基本相同的那些核素。由于同位素具有相同的壳层电子结构，因而，同位素的化学性质相同，称为同位素的相似性。而同位素的相异性表现于原子核结构的不同，即核内中子数不同，因而质量数不同。利用同位素的质量差异，发展了稳定核素的分析法——质谱法(mass spectrometry)。 同位素丰度(isotope abandance)是指某一同位素在该元素中所占原子的百分含量。 原子百分超(atom percent of isotope)是指在某一元素的标本或某一标记物中，某同位素丰度与该同位素天然丰度之差。 分子丰度(isotope abandeance)是指每100个分子中带标记核素的分子有多少，其中包括了天然稳定核素形成的标记分子；分子百分超不包括后者。 表11-1列举了常用的稳定核素及其天然丰度。 表11-l 几种常用稳定核素的原子量和天然丰度 核素 原子量12C=12.00000 天然丰度（%） 2H 2.014102 0.015 15N 15.000108 0.365 13C 13.003354 1.110 18O 17.999160 0.204 33S 32.971461 0.750 第二节 稳定核素及其标记物的测量分析 稳定核素的测量分析，主要包括测定稳定核素的丰度、核质量、标记化合物的结构及示踪原子在标记分子中的位置等。为此，在经典的质谱法基础上，发展了许多新的化学分离和分析技术，下面逐一作简要介绍。 一、质谱分析法 质谱法(mass spectrometric analysis) 是直接测量各种物质的原子或原子团的质荷比(m/z)，确定被测原子或原子团的性质和数量。它是稳定核素最基本、最通用和最有效的分析方法，它不受待测元素种类和物质形态的限制，灵敏度较高,精确度好。 质谱仪种类较多，近年来，仪器和使用的技术都有了巨大的进步。按照待测样品形式来分类，可分为两类：一类是同位素比值质谱仪(isotope ratio spectrometer)（无机质谱仪）；另一类是对一些有机物进行定性甚至定量分析的仪器，称为有机质谱仪，此类仪器常与气相层析仪或高效液相层析仪相连接，并与计算机联机，进行数据记录与分析处理，称为气-质联用仪（GC-MS）或液-质联用仪(LC-MS)。尽管此两大类仪器在设计上有许多差别，但其工作原理是相同的，包括5个主要环节，即样品的准备、样品的电离、离子束流的出射和分离、离子束流的接收和数据处理。相应地仪器就包括五个主要系统，即进样装置，离子源、质量分析器、检测器和数据处理系统。 当样品通过进样装置进入离子源之后，经过离子源中物理和（或）化学的作用，成为带电荷的离子。带正电荷的离子随后进入质量分析器中，根据这些离子的质量与电荷的比值（质荷比，m／z）的不同，分离成为许多单一质荷比的离子束。这些离子束再逐步被检测器所检测，然后再通过数据分析系统分析和储存。 （一）质谱仪的基本部件 1．离子源 离子源将被分析物电离成离子，并经过电极系统加速到一定能量，聚集成具有一定能量的离子束，进入