尿沉渣细胞检查自动化.docVIP

尿沉渣细胞检查的自动化 自尿液检查对全身性疾病特别是肾、泌尿系疾病的诊断重要性明确以来，人们对尿液的检查越来越重视。各种尿液分析仪的问世，对尿液化学成份和部分有形成分检查提供了可靠的数据，但对尿液有形成份的计数和形态学的分析还没有完全解决。由于有血细胞计数仪和流式细胞仪的开发经验，在世界上许多先进国家都有尿沉渣分析仪的问世。 一、尿沉渣自动化分析的发展历史 1988 年美国国际遥控影像系统有限公司（ International Remate Imaging Systems Co.， Ltd.），生产了世界上第一台yollow IRIS高速摄影机式的尿沉渣自动分析仪，简称y-1尿自动分析仪。 1990年日本东亚医疗电子有限公司(TOA Medical Electronics Co.，Ltd.)与美国国际遥控影像系统有公司合作，对原有的尿沉渣分析仪进行改进，生产出影像流式细胞式的UA-1000型和UA-2000型尿沉渣自动分析仪。由于此类尿沉渣自动仪对图像粒子测绘不十分满意，处理能力低，重复性不好，管型分辩不清，价格较昂贵等原因，故没能普及。 1995年日本东亚医疗电子有限公司在原来影像流式细胞式尿沉渣自动分析仪的基础上，将流式细胞和电阻抗技术结合起来，生产出新一代的UF-100型全自动尿沉渣分析仪(UF-100 Fully Automated Urine Cell Analyzer)。 二、全自动尿沉渣分析仪的原理 (一)、尿沉渣细胞分析的原理： UF-100型全自动尿沉渣分析仪使用流式细胞和电阻抗的原理：当一个尿液标本被稀释液稀释和染色液染色后，它靠液压作用通过鞘液流动池。当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时，它被一种无粒子颗粒的鞘液包围。然后，每个细胞从单个纵列的形式通过流动池的中心(竖直)轴线，在这里每个尿液细胞将被氩激光光束照射。每个细胞有不同程度荧光强度（Fl， fIuortscent light，从染色尿液细胞发出的荧光主要反映细胞的定量特性如细胞膜、核膜、线粒体和DNA）和散射光强度（这种仪器测定的是前向散射光，Fsc， forwat scattered light，它以成比例反映细胞的大小）和电阻抗的大小（电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比）。仪器正是将这种荧光、散射光和电阻抗的信号转变成电信号， 分析这些电信号才能使得每个尿液标本产生出直方图（histogram）和散射图（scattergram），然后分析这些图形即可区分每个细胞和得出每个细胞的形态。 (二)、检测模式 图 是UF-100型全自动尿沉渣分析仪检测的模式，它包括光学检测系统、液压系统、电阻抗检测系统和电子系统。 ⒈光学系统 光学系统由氩激光（波长488nm）、激光反射系统、流动池、 前向光采集器和前向检测器组成。 激光作为光源用于流式细胞分析系统，它被双色反射镜反射，然后被聚光镜收集形成射束点，这种射束点是椭园的并且聚集于流动池的中央。从氢激光发出的激光束被光束塞封闭。当样品流到流动池，每个细胞被激光光束照射，产生前向散射光和前向荧光的光信号。当无用的偏向光被带小孔的面板排除后，双色过滤器区分出前向散射光和前向荧光。 散射光信号被光电二极管转变为电信号，再输送给微处理器。根据光散射Mie散射定律，尿液标本在分析时，由于细胞的种类不同和分布不均， 光的反射和散射主要取决于细胞表面，因此散射光强度主要取决于细胞的大小，所以仪器可以从散射光的强度得出测定细胞大小的资料。 荧光通过滤光片滤过一定波长的荧光后，输送到光电倍增管将光信号放大再转变成电信号，然后输送到微处理器。 UF-100型全自动尿沉渣分析仪使用两种荧光染料：菲啶( phenantridine)和羧花青（carbocyanine）。前者染细胞的DNA，在480nm 光波激发时， 产生610nm的橙黄色光波，但该染料的渗透能力差； 后者是一种穿透能力较强的染料；它主要与细胞浆膜的脂层（细胞膜、核膜和线粒体）结合在460nm 的光波激发时，产生505nm的绿色光波。这些染料具有下列特性：⒈反应快速； ⒉背景荧光低；⒊从细胞发生的荧光与染料和细胞的结合程度成比例，因此，仪器通过分析荧光信号来获得细胞的不同资料。 ⒉液压（鞘液流动）系统 反应池染色标本随着真空作用吸入到鞘液流动池。固定体积标本被样品鞘液注射器集中通过流动池。为了使尿液细胞进入流动池不凝固成团一个一个地通过,加压的鞘液输送到流动池，使染色的样品通过于流动池的中央。 鞘液形成一股液涡流（似鞘流的电流）使尿液细胞吸成单个的纵例。这两种液体不能混合，这就表明尿液细胞永远在鞘液中心通过。如果有大颗粒存在，在流动池中它不可能凝固成团，因为有液体流体包围它。鞘液流动机制改进了细胞计数的准确性和重复性。当颗粒以纵列通过流动池的中心时，