第四章药物的含量测定方法及验证.ppt

五、定量限 是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应 具一定准确度和精密度。杂质和降解产物进行定量测定时，要求 LOQ. 常用信噪比法确定定量限，一般以S/N=10时，相应的浓度进行测定。 六、线性 是指在设定的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接 呈正比关系的程度。 UV法：首先制备一个标准系列，浓度点n =5; A = 0.3～0.7 建立回归方程C = aA + b ;r ＞ 0.999。 HPLC法：制备一个标准系列，浓度点n =5 ～7; 以C对h或A或与 内标物的峰面积之比，建立回归方程r＞0.999。 七、范围 是指达到一定精密度、准确度和线性、测试方法 适用的高低限度或量的区间。 原料药和制剂含量测定：范围应为测试浓度的80%～ 120%。 制剂含量均匀度检查：范围应为测试浓度的70%～ 130%。 溶出度或释放度中的溶出量测定：范围应为限度的±20%。 八、耐用性 是指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受 程度。典型的变动因素有：被测溶液的稳定性、样品提取次数、 时间等。 HPLC法变动因素有：流动相组成与pH，色谱柱，柱温，流速。 GC法变动因素有：色谱柱，固定相，担体、柱温、进样口和检测器温度等。 分析方法效能指标的要求 1、非定量方法：用于鉴别试验、杂质的限量检查，只对专属性、耐用性和检测限有要求，其余均无须要求。 2、用于原料药中主成分或制剂中有效成分含量测定及溶出度测定，除了检测限和定量限外，其余均要求。 3、杂质测定或制剂中降解物测定：属于微量定量分析，除检测限不必要求外，其余七项指标均应有所要求。 * 例：醋酸氢化可的松的含量采用HPLC法测定：取本品对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成每ml约含0.35mg的溶液。精密量取该溶液和内标溶液（0.30mg/ml炔诺酮甲醇溶液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图。另取本品适量，同法测定，按内标法计算含量。已知：对照品取样为36.2mg，样品取样为35.5mg，测得对照液中醋酸氢化可的松和内标的峰面积分别为5467824和6125843，样品液中药物和内标的峰面积分别为5221345和6122845，计算本品的含量 概述 含金属与卤素药物须处理后进行测定。处理方法视结合牢固程度而异。卤素与芳环相连牢固；与脂肪族碳相连，结合不牢固。 含金属药物：金属不直接与碳相连为含金属的有机药物，不牢固，一般直接测定；金属与碳相连为有机金属药物，须适当处理。 第二节 定量分析样品前处理方法 不经有机破坏的分析方法 经有机破坏的分析方法 1、直接测定法 金属元素不直接与碳原子相连的含金属有机药物或C-M键结合不牢的有机金属药物，在水溶液中可电离，不须破坏直接采用适当的方法测定 如葡萄糖酸钙中的钙离子-EDTA络合滴定 一、不经有机破坏的分析方法 2、经（酸、碱）水解后测定法 方法原理（卤素）：将含卤素的有机药物溶于适当溶剂中，加氢氧化钠或硝酸银溶液加热回流使其水解，将有机结合的卤素，经水解作用转变为无机卤素离子，然后采用间接银量法测定。如三氯叔丁醇的测定。 间接银量法：定量加入过量的AgNO3 ，过量的硝酸银以硫氰酸铵为滴定剂，硫酸铁铵为指示剂滴定。 CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH △ 回流 (CH3)2-CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O NaCl + AgNO3 AgCl↓ + NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN ↓ + NH4NO3 （淡棕红色） (Ksp=1.56×10–10 ) (Ksp=1.0×10-12 ) Fe3+ + SCNˉ Fe (SCN) 2+ 3、经还原后测定法 碱性还原后测定 方法原理；在氢氧化钠和锌粉存在的条件下，有机药物（多用于含碘有机药物）加热回流，发生还原裂解反应，使有机结合的卤素（碘）转变为无机卤素离子（碘离子），继而采用间接银量法或其他方法进行测定，如泛影酸的测定。 适用范围：碘原子与苯环直接相连的药物。 例 泛影酸的测定 取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液(0.