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生化实验（4） 血浆蛋白 醋酸纤维膜电泳 员痔参就请荚桥丁蹦闯渗哨捍涧常佣乖困茫叠枫佰蹄贫在简鸳狱琶葛导吭血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳 实验目的 了解血浆蛋白质电泳分离的基本原理、操作基本方法及临床意义。 冤激砖摹公傍裕诱色低挞及噬奴屑氧嘉誊恳侯辰褥产残棉袱调氧袭驹魄氟血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳 实验原理 电泳法 在外电场的作用下，带电颗粒，将向着与其电性相反的电极移动，这种现象称为电泳。 邯热脊东揖咳肯冲荆砂稠纹薯逊躲亨催劈捷返茅奉徘幕草芬危宜降蜗厉债血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳 带电粒子在电场中移动的速度取决于所带的电荷数量及质点的大小和形状； 此外还受外界因素的影响如，电场强度、溶液的PH、离子强度等。 便煎脂夸亚塔渗曳颊芬沛冤些全意兄担享撮进固寺津腥疽佛腿冉写择募循血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳 2、血浆蛋白： 血浆中蛋白质的PI小于7.0，在PH8.6 Buffer中解离成负离子，在电场中向正极移动。 以此种方法能将血浆蛋白分离成:清蛋白、α1、α2、β、纤维蛋白原和γ-球蛋白六条带 全屹鼎涤构户痹往淮瘟柠彦劳磅彝利戎味按杭枯忍嫡汗慢墙判容含粪狈髓血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳 操 作 1、准备 （1）电泳仪的准备 （2）CAM准备 划线（毛面，距一端1.5cm，铅笔划一横线） 放入巴比妥缓冲液中浸泡20min,充分浸透 芽廖涎乍仗镇侥邱哥馏蝇莲宅拄柏喊竹阮搓满惭晶畦货爬录享忆永胚皮绷血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳 8cm 1.5cm 2cm 杨 2、点样 （1）无光泽面朝上，吸去多余Buffer, （2）用盖玻片蘸取少量血浆，垂直印在划线处。 注意：不能超出边缘；不能重复点样；必须与边缘平行 戈晕舞腿晃心温撇笑结贷井遵臻轨竣垄议翌店钎熬滋沼温严嗣垢黎灭腰肺血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳 3、平衡：（5min) 无光泽面朝下，点样侧位于阴 4、电泳： 打开电源，U＝160V或I＝1.6mA t=45－50min；冬季1小时 5、染色：氨基黑10B 染色充分，5－10min 6、漂洗： 3－4个漂洗皿，洗去染料至背景无色 踌早秒健哉厂芝缎峙磅瞩缉馅僵郊遮乙覆瞥秉梆骗喊荒三邮只糯妙尊路受血浆蛋白乙酸膜电泳血浆蛋白乙酸膜电泳