第14章利用细菌生产生物燃料的脂质段愿选读.doc

第十四章 利用细菌生产生物燃料的脂质 摘要 由于能源价格的上涨导致了化石能源的短缺和环保意识的增强，使得从可再生资源中获取生物能源的需求急剧增加，特别是原油的需求。人们希望保留其流动性而不是旨在通过大规模的环境、经济和社会矛盾方面所付出的代价。因此，生物燃料的生产是很有前途的解决方案。本章节将讨论的是用作生物燃料的油脂的菌类产物。例如脂肪酸甲基酯乙基酯这些酯基代替品，通常指定为生物柴油；这些酯表现出一些优良特征，例如可生物降解，无毒，含硫量低和含芳香化合物少。现在，各类的植物油通过化学上的碱性催化或者酶催化的酯交换反应生产的生物柴油，已经被广泛的作为可再生能源使用。用存在于细胞内作为化合物的储存的微生物来源油来代替植物油的使用。在本章我们将会着重介绍体内脂质的合成和细菌的生产，同样也会引入细菌酰基转移酶——对于甘油三酯和蜡酯生物合成的关键酶。我们将会回顾尝试在大肠杆菌菌株中建立脂肪酸乙酯的形成和讨论这个所谓微生物柴油的前景。 前言 生物技术生产的在细菌中存储的化合物，例如聚羟其可以生物降解使得利用率大大增加。一个突出的例子是3－羟基丁酸和3－羟基戊酸的共聚物1 催化 R1—OCO—R‵ H2C—OH HC—OCO—R2 ＋ R‵—OH R2—OCO—R‵ ＋ HC—OH H2C—OCO—R3 酯交换 R3—OCO—R‵ H2C—OH 三酰基甘油 脂质 甘油 B 催化 HOOC—R4 ＋ R‵—OH R4 —OCO—R‵ ＋ H2O 脂肪酸 醇类 酯化作用 脂质 水 图14.1 三酰基甘油和游离脂肪酸分别通过酯交换（A）和酯化作用（B）和短链醇反应生产出生物柴油。R1到R4代表脂肪酸侧链，R‵代表醇侧链。 除了蜡酯和甾基酯外，三酰基甘油还作为中性脂质出现在植物、动物、酵母菌、真菌和细菌内。在植物中，三酰基甘油作为细胞内主要的储存脂质出现在种子里。有趣地是，希蒙得木 A 回收 B C 图14.2 不同种类的生物柴油通过脂质的来源以及酒精在酯交换过程中的用途来加以区分。我们将生物柴油为（A）植物油，动物油，微生物油脂或者废油脂与脂肪同石化甲醇进行酯交换过程；（B）植物油、动物油、微生物油或废油脂与脂肪通过脂肪酶、整个细胞或者生化醇类、石化醇类进行生物催化进行的酯交换过程；（C）微生物生物柴油产品，包括通过酯基交换过程后醇类的合成。 制备生物柴油的油的酶酯基交换 细胞外脂肪酶的使用已经被用于生产生物柴油而广泛研究，其目的是用来缓解碱催化的相关问题，例如废甘油的生产和生物柴油的净化。脂肪酸的不同来源用于甘油三酯与短链醇类通过酯交换反应生成烷基酯的探究。Shimada等报道，将甲醇逐渐加入到油脂中可以运用一种脂肪酸，这种脂肪酸是从固定在丙烯酸树脂中的南极假丝酵母中获得。在这种固定化系统下超过50次的作用会使得95%的甲基酯发生转化因此要尽可能避免脂肪酸作用于甲醇。在另一篇报道中，Watanabe等在一种批量生产系统中运用南极假丝酵母超过100天而不大量减少产量，使得甲基酯的含量增加至93%。非特异性酶的运用相较于配向性的脂肪酸显示相对高的转换率，这些酶不同于皱落假丝酵母、洋葱假单胞菌和荧光假单胞菌，例如从稻根霉菌得到的脂肪酸。当从稻根霉菌得到的sn-1（3）配向性脂肪酸被运用后，甲酯根在甘油三酯的sn-1和sn-3位可以获得而不能在sn-2位得到。这个发现反应了非特异性脂肪酸在生产生物柴油中的需求。 制备生物柴油的油在整个细胞体系中的酶酯基交换 许多研究报道，作为整个细胞生物催化剂的细菌、酵母菌和真菌的品种是用来加强酯交换过程的成本效益。在建立整个细胞生物催化体系中，丝状真菌已经被提升为工业酯交换和植物油甲醇分解应用最稳健的全细胞生物催化剂。在某些微生物细胞表面活性增强的异源表达膜结合脂肪酶已经在不同的酯交换过程中得到应用。Matsumoto等从米根霉的脂肪酶中发掘了一种酵母菌细胞表面显示系统。运用表面表达脂肪酶的一个主要优点是它们在醇解中能够简单的进入到基底里，呈现出不必要的催化细胞预处理从而减少产品价格。其他的研究论述了细胞内能产生脂肪酶并含异丙醇的酵母菌菌株的通透性，这种特性将进一步增加整个细胞生物催化的效率。 然而，通过整个细胞催化的酯交换反应相比较于通过固定化脂肪酶进行体外催化的过程更耗时。一个优秀的反应速度已经分别由Watanabe和Samu