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UltraVIEW VoX使用说明.PDF 27页

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UltraVIEW VoX使用说明 目录 第一部分 尼康 TiE 显微镜使用简介 2 第二部分 图像获取 5 第三部分 多点采集及拼接图像获取 10 第四部分 数据导出 18 第五部分 信号强度测量分析 23 第一部分 尼康 TiE 显微镜使用简介 1. 打开显微镜电源开关,等待初始化完成。 2. 打开荧光光源开关。 注:因荧光光源有寿命限制,请在需要目镜观察荧光信号时才开启荧光光源, 一旦开启,至少运行 30 分钟后再关闭。 3. 将标本稳固的放置在载物台上,夹紧标本夹。 4. 按下机身左侧物镜切换按键 OBJ 选择合适的物镜(或通过 RCP 液晶屏选取)。 5. 按下光路切换处的 EYE 按键,将光路转换至目镜下观察。 6. A. 如需明场观察,则从软件中打开明场光源开关。 6. B. 如需荧光观察,请先关闭明场光源开关。  点击 RCP 控制器上 按键,从弹出窗口中选择所需要的滤色块(具体滤 色块组成及编号请与设备管理员确认)。  DAPI 紫外蓝光  FITC 蓝色绿色  TRITC 绿色红色  ANALY DIC 检偏器  1 或6 号位为空位,用于共聚焦成像 7. 转动调焦旋钮调整焦平面到标本最佳位置进行观察。 注:高倍镜调焦时,为避免物镜升起高度过高压坏样品甚至损伤物镜,请先从 载物台上方,透过载物台上的间隙监视物镜运动至最高处,接近或轻触样品底 面,然后再用目镜观察并向下调整物镜位置,直至获得合适焦面。 8. 控制电动摇杆改变标本位置,寻找合适的视野。 9. 目镜下观察完成后。按下L100 按键,将光路切换至共聚焦成像光路(图像 投影至电脑屏幕)。 10. 将 RCP 上滤光片位置调整为空位,确认明场 光源处于关闭状态。 开始共 聚焦图像采集。 注意事项: 1. 油镜使用完后请立即使用擦镜纸和清洁液清洁镜头。(乙醚:无水乙醇=7:3) 2.荧光光源打开必须使用半小时以上才可以关闭,关闭后必须等待半小时以上才 再次开启。 3.当使用电动载物台,样品聚焦焦面比标本夹支架底部高时,请在切换高倍物镜 前确认物镜切换有足够空间,以免物镜切换时撞击样品夹导致其损坏。 附: DIC 微分干涉观察方式 (适用于玻璃皿,光路中不能有塑料介质) 1. 按照明视场透射光观察方法调节好显微镜; 2.把起偏器,检偏器移入光路(目镜观察 DIC,选择Analyes 滤色块;L100 光路 在屏幕上观察 DIC,选择空位滤色块,同时使用软件中的 DIC 光路观察); 3.按照物镜标注指示,将聚光器镜转盘转到相应N1/N2 模块位置,对应的物镜 DIC Slider 置入物镜转盘物镜下对应插口处; 4.检查光路是否在EYE 状态; 5.旋转起偏器,选择最佳显示效果。 PFS 完美对焦系统(适用于玻璃皿) 1. 确认物镜转轮右侧的开关拨至 in档位。 2. 打开显微镜面板上 PFS 开关 注:指示灯稳定亮起,说明 PFS 焦面锁定;若指示灯闪烁,说明 PFS 无法找到锁定 焦面,PFS 在当前状态下无法工作(在样品底面不平时容易出现此状况,在高倍镜 下锁定难度加大) 3. 改用完美对焦调焦手轮调焦。 注:当 PFS 工作时,显微镜两侧的调焦旋钮失效。 第二部分 图像获取 1. 开启硬件(自左至右,自上至下,顺次打开电源插座上的开关),开启电脑和 显示屏。 2. 双击桌面上的 Volocity 图标开启软件。 (如果提示输入账号密码,直接点 击 connect 即可) 3. 为本次实验操作新建或开启一个图像库 Library。 4. 样品放置到显微镜载物台上, 目镜下使用明场或宽场荧光(汞灯)光路聚焦样 品,找到合

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