苦参总碱对血管平滑肌细胞增殖和迁移影响.pdfVIP

Master’s Degree Dissertation of Chongqing University Effects of Mechanism of Sophora Flavescens Alkaloids to Migration and Proliferation of VSMC M.D. Candidate: Jiang Hongyan Supervisor: Prof. Wang Guixue Major: Biomedical Engineering College of Bioengineering Chongqing University October 2007 摘 要 经皮冠状动脉腔内成形术(Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty ， PTCA)是目前治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的主要手段，但术后 3～6 个月的再 狭窄(Restenosis，RS)发生率高达 30%～50%，大大限制了它在临床上的应用。因 此，再狭窄的防治成为心血管病研究领域中的热点问题。近年来，雷帕霉素和紫 杉醇药物涂层支架在防治 RS 临床试验中取得较好的效果，但仍存在一些不能忽视 的问题，因此开发出较雷帕霉素、紫杉醇毒副作用更小，更为安全的支架涂层药 物至关重要。 再狭窄的发生是众多因素相互作用的十分复杂的过程，包括内膜损伤，血栓 形成，中膜血管平滑肌细胞的迁移、增殖，以及血管重塑等一系列病理变化过程。 目前认为支架内再狭窄的机制主要是血管损伤后的血管内膜增生，而血管平滑肌 细胞的增殖和迁移是后者主要原因之一。针对这一主要病理环节，本文选取中药 制剂苦参提取物——苦参总碱，研究其对血管再狭窄的防治作用。本文通过体外 细胞实验，研究苦参总碱对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响，并初步探讨相关 作用机制。本文主要研究内容及结果如下： ① 苦参总碱对血管平滑肌细胞增殖的影响：在体外通过 MTT 法检测 24h 、 48h 、72h 三个时间点上不同浓度苦参总碱对血管平滑肌细胞增殖的影响；考马斯 亮兰测定细胞总蛋白含量；采用流式细胞仪分析细胞周期。研究结果表明，与对 照组相比，苦参总碱对血管平滑肌细胞增殖具有抑制作用，该作用呈剂量及时间 的依赖性；流式细胞术检测结果表明，苦参总碱可以使处于 Go/G1 期的血管平滑 肌细胞百分比增高。 ②苦参总碱对血管平滑肌细胞迁移的影响：用流动腔装置检测生理剪切流场 下测定不同浓度苦参总碱对平滑肌细胞迁移的影响。研究结果显示，与对照组相 比，随着苦参总碱浓度增加体外培养的血管平滑肌细胞迁移距离缩短。 适宜浓度的苦参总碱可明显抑制体外培养的血管平滑肌细胞的增殖，迁移。 苦参总碱的上述作用可能是通过阻滞血管平滑肌细胞通过细胞周期中的限制点， 使其停滞于 G / G 期来起作用的。 0 1 关键词：苦参总碱，血管平滑肌细胞，细胞增殖，细胞迁移，细胞周期 ABSTRACT Percutaneous transluminal coronary angioplasty (PTCA) has become the most common major method to treat coronary atherosclerotic heart disease. However, restenosis (RS) which occurs in 30% to 50% of patients within 3~6 months is an important limitation of clinical application of this method. The prevention and cure