展示南极假丝酵母脂肪酶B的毕赤酵母全细胞催化合成短链.PDF

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, December 25; 25(12): 1927-1932 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究报告 B 金子, 林影, 黄登峰, 苏国栋, 韩双艳 , 510006 : 展示酶的酵母细胞作为全细胞催化剂, 既具有固定化酶的优点, 又有制备简单、成本较低的特点。本研究将细 胞表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B, CALB) 的重组毕赤酵母用于非水相中催化合成短链芳香 酯, 通过滴定和气相色谱的方法测定底物酸的转化率, 从底物的碳链长度、醇的结构、酵母冻干粉的添加量、底物浓度 及底物的酸醇摩尔比等方面考察了展示 CALB 的毕赤酵母全细胞催化合成短链芳香酯的特性。研究结果表明: 该全细 胞催化剂可催化C10 以下的酸和醇直接酯化合成多种短链芳香酯, 酸的转化率达到90% 以上; 其中己酸和乙醇为酶的最 适底物; 酵母冻干粉的添加量20 g/L(306.0 U/g-dry cell) 、己酸浓度0.8 mol/L 、酸醇摩尔比1:1.1 是合成己酸乙酯的最佳 条件。在此条件下反应 1.5 h, 己酸的转化率达到97.3% 。在现有的关于脂肪酶非水相催化合成短链芳香酯的报道中, 该 全细胞催化剂显示出较好的底物耐受性以及较高的催化反应速率。因此, 展示 CALB 的毕赤酵母全细胞催化剂在合成 短链芳香酯方面具有较大的商业化应用潜能。 : 酵母表面展示, 南极假丝酵母脂肪酶B, 全细胞催化, 短链芳香酯 Synthesis of flavor esters catalyzed by CALB-displaying Pichia pastoris whole-cells in non-aqueous phase Zi Jin, Ying Lin, Dengfeng Huang, Guodong Su, and Shuangyan Han School of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China Abstract: An enzyme-displaying yeast as a whole-cell biocatalyst seemed an alternative to immobilized enzyme, due to its low-cost preparation and simple recycle course. Here, we tried to use a recombinant Pichia pastoris displaying Candida antarctica lipase B (CALB) to catalyze the synthesis of short chain flavor esters in n-heptane. W