草鱼头肾免疫细胞组成和数量变化.PDF

维普资讯 动 物 学 研 究 1998，19 (1)：I1一l6 CN 53—1040／Q ISSN 0254—5853 Zoolo ealRe．arch 草鱼头肾免疫细胞组成和数量变化 卢全章 _ — _ — ～ (中国科学院水生生物研究所 武汪 430072) 摘要 通过光镜和电镜观察发现，草鱼 (Cleno肿aryngodonidellus)头肾器官有两种静脉 (头肾静脉和门静脉)和丰富的血窦。淋巴细胞主要分布在门静脉及其血窦周围，形成淋巴细胞 聚集区。粒细胞主要分布在头肾静脉及其血窦周围，形成粒细胞聚集区。头肾含有大量的免疫细 胞．其中淋巴细胞约占62．2％ ，粒细胞约占36．6％，单棱细胞和巨噬细胞约占1．2％ 。本研究 检测了不同生长发育期的草鱼头肾器官重量及其免疫细胞数量。结果说明草鱼头肾器官重量随体 重和鱼龄 (特别是体重)的增加而增加，头肾免疫细胞总数则随头肾重量增加而相应增加，但是 每毫克头肾组织的免疫细胞数则通常是稳定在 10O一132万个之间，均值 117．3(±9．98)万个。 关键词垫 ，兰 ，墨 中图分类号 Q959468 头肾是硬骨鱼类特有的重要淋巴器官。现有的文献表明硬骨鱼类的头肾中含有B淋 巴细胞 (Smith等，1967~Rijkers等，19803Lamers等，1985~Razquin等，1990)、T 淋巴细胞 (Baba等，1988~卢垒章等，1993)和各种粒细胞 (Taguchi，1975jSuwa， 19772Bigaj等，1987)等免疫细胞。表明头肾对鱼娄免疫具有很重要的作用。因此，鼻 清头肾器官的组织结构、免疫细胞及其免疫功能，对鱼病防治很有意义。然而，国内关于 这方面的研究很少，国外虽有一些研究，但比较零碎，还有许多不明之处需研究。特别是 对我国主要养殖鱼类之一的草鱼的头肾器官更是缺乏研究。 本研究的 目的，主要是搞清草鱼头肾组织中免疫细胞的分布、种类组成、头肾重量及 其与免疫细胞数量变化之间的规律。 l 材料和方法 试验鱼：取 自本所养殖场养殖的正常草鱼。有 当年、I龄、 Ⅱ龄、Ⅲ龄、Iv龄和Ⅵ龄草 鱼，总共 1o0多尾。 头肾重量及其免疫细胞总数的测定：试验鱼先称体重然后断尾放血，用无菌操作进行解 剖，取出垒部头肾组织，分析天平称重。再取一定量的头肾组织，用无菌剪刀剪碎，过不锈 钢筛，无菌 Hanks液洗下，l00目的尼龙网过滤，翩成一定浓度的细胞悬液，立即采用血细 胞计数板计数。免疫细胞总数包括垒部淋巴细胞、粒细胞、单核细胞、巨噬细胞等所有白细 胞。 ·国家 自然科学研究基金资助项 日 本 】996—0925收到，】997—05 13修 维普资讯 2 动 物 学 研 究 19卷 头肾免疫细胞分类计数：采用头肾印迹片，Giemsa染色，按印迹片 自然分布计数 l000— 2000个免疫细胞，进行分类统计。 光镜组织标本制作：采用 Bouins液固定，常规石蜡包埋，4—5m 厚切片，HE染色。 头肾印迹片采用 Giemsa染色。 电镜组织标本制作：用 3％的戊二醛卡可酸钠缓冲液作前固定，1％的锇酸作后固定，酒 精系列脱水，树脂包埋，超薄切片，电子染色后用透射 电镜观察。 2 结果 2．1 草鱼头肾及其免疫细胞分布 草鱼头肾位于胸腔内咽退缩肌上方两侧，围绕心腹隔膜前面的食道背面和两倒J分布。 头肾呈扁平状，分左右两叶，两叶头肾在基部相连。头肾基部组织通过第 4脊椎横突基部 和横隔骨片 (悬器)基部两侧的小圆孔，与腹腔内肾脏组织的最前端相连接 (图版 I： 1，2)。心腹隔膜前为头肾，心腹隔膜后为肾脏。 头肾无被膜，外周仅有一层胶原纤维包裹。组织切片观察，头肾实质中无肾单位，完 全属于网状淋巴组织。主要 由网状细胞、淋巴细胞、粒细胞、单核细胞、巨噬细胞等细胞