第八章分光光度法课件.ppt

;一、吸收光谱原理 1.吸收光谱法：在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。又称吸光光度法。; 红外吸收光谱法：吸收光波长范围2.5-1000 nm ,主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱法：吸收光波长范围200-400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱法：吸收光波长范围400-750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 ;2.光的基本性质 电磁波的波粒二象性;磁场向量;微粒性;波粒二象性;光学光谱区;（1）互补色光：若两种颜色的光按某适当的强度比例混合后可成为白光,则这两种色光成为互补色光。例如,黄光和蓝光。 ;（2）物质的颜色与光吸收的关系 物质之所以呈现不同的颜色是物质对光选择性吸收造成的。 溶液在日光的照射下,如果可见光几乎均被吸收,则溶液呈黑色;如果全不吸收,则呈无色透明;若吸收了白光中的某???色光,则呈现透射光的颜色,即被吸收光的互补色。;;(3) 溶液中溶质分子对光的吸收与吸收光谱;（4）吸收曲线：在同样的条件下依次将各种波长的单色光通过某物质溶液,并分别测定每个波长下溶液对光的吸收程度(吸光度A),以波长为横坐标,吸光度为纵坐标得到的A～λ曲线,称为该溶液的吸收曲线，又称吸收光谱。 ; 最大吸收波长λmaxb:吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax;吸收曲线的讨论: ①同一种物质对不同波长光的吸光度不同。 吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax 。 ②不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。;③吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。 ④在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。;300;;4. 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律;T－透光率（透射比）（Transmittance）;吸光度A、透射比T与浓度c的关系;K 吸光系数 Absorptivity ;摩尔吸光系数ε的讨论： ①ε是吸收物质在一定波长下的特征常数。温度和波长等条件一定时，ε仅与吸光物质本性有关，而与其浓度c和光程长度L无关； ②可作为定性鉴定的参数； ;③同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。ε越大表明该物质对某波长的光吸收能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。 ε代表测定方法的灵敏度。;吸光度与光程的关系 A = ?Lc ;吸光度与浓度的关系 A = ?Lc L2>L1;例: 1.有一溶液,在λmax=310nm处的透光率为87%,在该波长处时的吸光度为多少？ 解：T＝87％； A＝－lgT＝－lg87％＝0.06 2.已知苯胺的λmax=280nm, ε=1430,有一含苯胺的水样,在1cm比色皿中测得吸光度为0.52,求该水样中苯胺的含量。（以mg/L表示) 解:;3. 某有色化合物的0.0010%水溶液,在510nm处,用 3cm比色皿测得吸光度为A=0.57,已知摩尔吸光系 数为2.5×103L/mol.cm,求该有色配合物的摩尔质 量。 解：; 0 1 2 3 4 mg/ml;偏离朗伯—比耳定律的原因 朗伯—比耳定律知,吸光度与溶液的浓度成正比,即A～C呈线性关系, 标准曲线法测定未知溶液的浓度时发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗伯—比尔定律的偏离。 ;引起这种偏离的因素（两大类）： （1）物理性因素 朗伯—比尔定律的前提条件之一是入射光应为单色光。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对朗伯—比耳定律的正或负偏离。 (2) 化学性因素 朗伯—比尔定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用。故：朗伯—比尔定律只适用于稀溶液(浓度大,易发生偏离)。溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时,使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。 ;8.2 比色法和分光光度法;2. 光电比色法;二、分光光度法;光源;722型分光光度计结构方框图;分光光度计的主要部件;吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区： 石英池 检测器：利用光电效应，将光能转换成 电流讯号。 光电池，光电管，光电倍增管 指示器： 低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录;棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同;光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、24