HPLC-柱后生物活性检测在线联用技术在天然活性成分筛选中.PDFVIP

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 ·1047 · ·综 述· HPLC-柱后生物活性检测在线联用技术在天然活性成分筛选中的应用 王晓飞，焦海胜，李玉民* 兰州大学第二医院，甘肃 兰州 730030 摘 要：HPLC 由于分离度和灵敏度高，其在柱后与生物活性检测联用形成的天然活性成分筛选技术，具有操作简单、耗费 低、灵敏度和专属性高等优点，已用于天然产物中抗氧化剂、乙酰胆碱酯酶（AChE ）抑制剂、磷酸二酯酶（PDE ）抑制剂、 血管紧张素转移酶（ACE ）抑制剂、细胞色素P450 抑制剂等的筛选。综述了 HPLC-柱后生物活性检测在线联用技术在天然 活性成分筛选研究中的应用，同时对其优点和不足进行了总结。 关键词：HPLC ；生物活性检测；天然产物；活性成分；筛选 中图分类号：R285.51 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)08 - 1047 - 07 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.08.025 Application of on-line technology with HPLC-post-column bioactivity assay in screening active constituents from natural products WANG Xiao-fei, JIAO Hai-sheng, LI Yu-min Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730030, China Key words: HPLC; bioactivity assay; natural products; active constituent; screening 随着“回归自然”浪潮的兴起，以及对药物毒 1 天然抗氧化剂 副作用及耐药性的认识，从天然产物中寻找安全有 利用抗氧化剂的化学特性 （还原性），采用HPLC- 效的药物已引起国内外学者的高度重视。然而，由 柱后生物活性检测在线联用技术建立的天然产物中 于天然产物化学成分的多样性及作用机制的复杂 抗氧化剂的筛选方法，是将经分离的化合物在柱后 性，天然活性成分的筛选一直是药物研究的瓶颈。 与抗氧化活性检测试剂作用，最终通过作用前后吸 随着科学技术的发展，天然活性成分的筛选方法已 光度是否发生变化，是否引起检测试剂结构发生变 经由传统的化学分离、结构鉴定、活性测定模式发 化来进行筛选。根据活性检测试剂的不同，该方法 展到了活性导向的分离，进而形成了以药物基本特 可分为 1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH ）法、2, 2- [1] 性为基础的 HPLC-柱后生物活性检测在线联用技 联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二盐（ABTS ）法 术。该技术由于实现了化学分离和生物活性检测的 和磷钼络合物法。HPLC-柱后生物活性检测在线联 同步进行，克服了传统药物筛选方法存在的操作繁 用技术在天然产物中筛选抗氧化剂的应用见表 1。 琐、成本高等缺点，已被广泛地应用于天然产物中 1.1 DPPH 法 抗氧化剂[1]、乙酰胆碱酯酶（AChE ）抑制剂、磷酸 Koleva 等[13]首次采用 HPLC-柱后生物活性检 二酯酶（PDE ）抑制剂、血管紧张素转移酶（ACE ） 测 DPPH 法建立了天然产物中抗氧化剂的筛选方 抑制剂、细胞色素 P45