猫腰髓年龄相关的形态学变化探究.pdf

猫腰髓年龄相关的形态学变化研究 摘 要 作为低级反射中枢和兴奋传导通道，脊髓形态结构的年龄性变化对其反射 和传导功能可能会有重要影响。本文通过对青年猫和老年猫腰髓形态结构的比 较研究，为脊髓生理功能衰退的研究积累基础形态学资料。 1. 以青年成年猫(1 －3 龄，2 －2.5kg)和老年猫(12 龄，3-3.5 kg)L6 段脊髓为 研究对象，用神经丝蛋白(NF)免疫标记神经纤维，分别计数青年组和老年组白 质各索中神经纤维数，进行统计学比较分析；透射电镜观察腰髓后索的横断面 超薄切片，分别测量青年组和老年组后索有髓神经纤维的纤维直径和轴突直 径，绘制直径谱直方图，并比较两组个体轴突直径(d)与纤维直径(D) 的比值。 结果表明，与青年组相比，老年组各索神经纤维密度显著下降(p0.01)，NF 免 疫反应阳性较弱；老年组有髓神经纤维明显杂乱，髓鞘形状不规则，部分神经 纤维出现髓鞘松解、髓鞘囊泡及髓鞘增生现象。通过神经纤维和轴突直径谱， 可见老年组小直径纤维明显减少。大直径纤维中，老年组轴突明显变细，但神 经纤维相对变粗。老年组轴突直径与神经纤维直径的比值(d/D)较青年组小。以 上结果表明，衰老过程中，脊髓白质神经纤维有明显丢失现象，轴突萎缩，髓 鞘增生，这些变化可能会导致脊髓相应部位的传导能力受影响。 2. 用改良的 Holzer 结晶紫染色显示所有胶质细胞，成年动物 Golgi 法显示 胶质细胞形态，胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫染色显示星形胶质细胞，光镜下 对青年猫和老年猫腰髓白质中胶质细胞进行形态学观察和定量研究。与青年猫 相比，老年猫腰髓白质中胶质细胞密度显著增大(p0.01) ，GFAP 免疫阳性 (GFAP-IR)细胞密度显著增大(p0.01)，GFAP-IR 细胞阳性反应较强，胞体明显 膨大，突起稠密粗大。表明在衰老过程中，脊髓白质有明显的胶质细胞增生现 象。提示白质中胶质细胞的增生可能是对神经纤维丢失的补偿性增生，从而延 缓脊髓的衰老。 3. 用免疫组织化学 ABC 法观察和比较 γ-氨基丁酸(GABA)能神经元和 5- 羟色胺(5-HT)能神经元在青年猫和老年猫 L6 段脊髓中的分布，探讨 GABA 能 神经元和 5-HT 能神经元在脊髓中分布的年龄相关变化及意义。(1)GABA 免疫 染色结果显示，青年猫与老年猫 L6 段脊髓灰质内，GABA 能神经元及神经纤 维分布广泛，各个 Rexed 板层均可见 GABA-IR 细胞，其中背侧灰质阳性最强， 其次是腹侧灰质。标记的 GABA 胞体为卵圆形、三角形、多角形和星形，可 分为大、中、小三种类型。经比较，老年组 GABA 能神经元的数量及免疫反 应性均明显低于青年组。提示脊髓中 GABA 能神经元的分布有明显的年龄相 关变化，并可能对脊髓的调节机能有影响。(2)5-HT 免疫染色结果显示，在青 年猫与老年猫 L6 段脊髓灰质中，5-HT 能神经元与神经纤维分布广泛，多个 Rexed 板层均可见 5-HT 阳性神经元，主要分布于 Rexed Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ区。5-HT 能神经纤维阳性较强的区域有 Rexed Ⅰ、Ⅱ区及Rexed Ⅶ、Ⅷ区，Rexed Ⅹ区 未见阳性标记。经比较，老年组腰髓中 5-HT 能神经元的数量及免疫反应性均 明显低于青年组。表明猫腰髓中的 5-HT 表达有明显的年龄相关变化，该变化 与脊髓中 5-HT 的合成、重摄取及代谢分解功能的变化有关，可能对脊髓水平 伤害性信息的调制有重要影响。 关键词: 猫；腰髓；衰老；神经纤维；电镜；Holzer 染色；Golgi 染色；免疫 组织化学；神经丝蛋白；胶质纤维酸性蛋白；γ-氨基丁酸；5-羟色胺 Studies on Age-Related Morphological Changes in the Lumbar Spinal Cord of Cat Abstract The spinal cord is a lower ref