病理生理学，酶.ppt

第五章 酶;新陈代谢;酶学研究简史1;酶学研究简史2;酶是由活细胞产生的，具有催化作用的蛋白质。 核酶是具有高效、特异催化作用的核酸，其主要是作用参与RNA的剪接。;第一节 酶的分子结构;一、酶的分子组成;单纯酶;结合酶;全酶的结构与分子组成;辅助因子;辅酶与酶蛋白结合得较松，用透析或超滤等方法易于分开； 辅基与酶蛋白结合得牢固，不易与酶蛋白脱离。;由酶催化进行的化学反应称为酶促反应。 酶促反应的反应物称为酶的底物。;酶的活性中心;酶的必需基团;酶的必需基团分类;酶活性中心内的必需基团;;单体酶 寡聚酶 多酶体系 多功能酶;单体酶;寡聚酶;多酶体系;多功能酶; 同工酶是指能催化同一化学反应，但酶蛋白的分子组成、结构、理化性质乃至免疫学性质和电泳行为都不同的一组酶。;L-乳酸脱氢酶的同工酶;;葡萄糖 丙酮酸 乳酸（LDH5：丙酮酸还原酶）骨骼肌 经血液运输 三羧酸循环 丙酮酸 乳酸（LDH1 ：乳酸脱氢酶）心肌 NADH+H+ NAD+ 氧化磷酸化 ATP;第二节 酶促反应的特点和机制;酶的催化效率极高 酶催化反应具有高度的特异性 酶的不稳定性 酶催化活力与酶量的可调节性;邻近效应和定向效应 表面效应 酸碱催化作用 张力作用 共价催化作用;㈡、决定酶作用特异性机制;第三节 酶促反应动力学; 酶促反应动力学研究酶促反应速度及其影响因素，即通过定量观察单位时间内底物的减少或产物的生成量来研究酶浓度、底物浓度、温度、pH值、抑制剂和激活剂对酶促反应速度的影响。;[E];二、底物浓度对反应速度的影响; ;;; 当底物浓度高达一定程度，反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应。;第一步: E+S ES ;;当底物浓度为极低水平时，[S]《Km，则V≈ （Vmax/Km）[S] ，反应速度V与底物浓度 [S]成正比； 当底物浓度为极高水平时，[S] 》Km，Km值可忽略不计，则 V ≈ Vmax ，此时反应速度V达最大速度Vmax，底物浓度已不再影响反应速度。;[ES]生成速度V1=K+1 [E] [S] ∵ 游离酶浓度[E]=酶总浓度[Et] – [ES] ∴ V1=K+1 （[Et] – [ES]）[S] [ES]分解速度V2 = K– 1 [ES] + K+2 [ES] =（ K– 1 + K+2 ）[ES] 恒态时V1= V2 ，即K+1 （[Et] –[ES]）[S] =（ K– 1 + K+2 ）[ES] ;V= K+2 ; ;Km值是酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度 Km值对某一特定酶来说是个常数，可以反映酶的种类 反映酶与底物的亲和力，可以用来确定最适底物 计算底物浓度和相对速度 计算酶的转换数 反映激活剂或抑制剂的存在;㈡、Ｋm值与Ｖmax值的测定;酶活性达到最大时的反应温度称为酶的最适温度。;※ 低温不会使酶破坏，温度回升时，酶活性又可恢复;温度与酶促反应速度的关系;20 40 60 t℃ ;酶活力最大时溶液的pH值称为酶的最适pH。;pH值与酶活性之间的关系;酶;使酶的活性下降而又不引起酶蛋白变性的物质称为酶的抑制剂。 抑制剂使酶的活性降低的现象称为酶的抑制作用。 某些物理因素及化学物质可使酶发生不可逆的变性称为酶的钝化作用，不属于抑制作用的范畴。; ※ 抑制作用是抑制剂通过对酶的活性中心施以直接或间接影响的结果，酶分子的空间结构并未遭到破坏。;不可逆抑制作用 可逆性抑制作用;E + I EI;巯基酶抑制剂 丝氨酸酶抑制剂;㈡、可逆性抑制作用;竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用;作用特征;使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质称为酶的激活剂。 激活剂使酶活性提高，加速酶促反应的现象称为酶的激活作用。;激活剂的分类;酶活性的高低一般用他催化某一特定反应的速度来表示。 测定酶活性就是测定酶促反应速度，酶促反应速度越快酶活性越高；反之，酶促反应速