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抗凝血及未抗凝血对血型鉴定影响【摘要】 目的 分析未抗凝标本凝血块洗下红细胞、抗凝标本血浆对ABO正反定型鉴定的影响。方法 采集1000例受血者未抗凝与抗凝标本各一管，用生理盐水法进行ABO正反血型鉴定。结果 1000例未抗凝标本凝血块洗下红细胞做正定型，镜下有9例出现凝集，占09%(9/1000)；抗凝标本血浆做反定型，有310例出现缗钱状凝集，占31%(310/1000)。结论 未抗凝标本凝血块洗下红细胞对ABO正定型有影响；抗凝标本血浆对ABO反定型的影响显著。因此 我们认为选择用抗凝标本的红细胞做正定型，未抗凝标本的血清做反定型，实验结果准确度更高。 【关键词】 抗凝血；未抗凝血；血型鉴定 1 资料与方法 11 标本来源 2011年2月至11月各临床用血科室提供给输血科的受血者输血前经过EDTAK2抗凝的标本1000例，未抗凝的标本是从检验科找出同一个患者用来检验生化内容的不抗凝的标本1000例。经过EDTAK2抗凝的标本一份2 ml，不抗凝的标本一份5 ml。以上标本都是经过专业培训的各个临床护士采集后提供的。 12 试剂与仪器 抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)，长春博德生物技术有限责任公司生产的。人ABO血型反定型用红细胞试剂盒，上海血液生物医药有限责任公司生产的， 均在有效期内使用。TDZ4WS型低速台式离心机，XSPC204型显微镜。 13 检验方法 盐水试管法进行正、反血型鉴定：将不抗凝标本的凝血块用盐水混匀5次，红细胞洗涤3次，配成3%～5%红细胞悬液进行ABO正定型鉴定，血清标本的反定型及抗凝标本的正反定型鉴定均严格按照文献［2］方法操作。 2 结果 见表1。 3 讨论 血型鉴定的结果不准确由多种因素造成，其中，采集的血液标本不规范和实验人员的责任心不强、操作不当是主要的因素。抗凝剂的选择，也是重要的环节。我们对使用不同抗凝剂下的抗凝血进行了比较，对体检健康者的EDTAK2抗凝血和未抗凝血进行玻片法、试管法和微柱凝胶法血型鉴定，对结果进行比较分析。结果:EDTAK2抗凝血和未抗凝血进行玻片法、试管法和微柱凝胶法血型鉴定时，结果一致，差异无统计学意义(P005)；EDTAK2抗凝血的结果均清晰易判读，而非抗凝血标本中的自然凝块易对观察结果产生干扰，容易引起错误鉴定。EDTAK2抗凝血进行血型鉴定时优于未抗凝血，可以代替传统的无抗凝血标本进行血型鉴定。目前我院采用EDTAK2抗凝的标本进行血型鉴定。1管标本对正确鉴定ABO血型有一定的局限，诸多因素会影响血型的鉴定，例如用不抗凝标本的凝血块洗下红细胞做正定型会出现类似混合样的凝集，且滴加盐水后凝集不散开。其原因可能是由于凝血块洗下红细胞中混有不同凝集程度的红细胞，使正定型出现MF凝集，造成血型结果难以判断。其凝集不是抗原抗体真正的凝集反应，而是在红细胞中混有散在小凝块，红细胞物理性的凝集在一起，没有抗体参与；镜下可见，视野中除去小部分的凝集块外，大部分红细胞形态正常，分布均匀，不被破坏，血红蛋白亦不外漏，视野背景清晰。而真正的抗原抗体凝集，具有特异性，相应抗原特异性结合相应抗体，显微镜下可见红细胞凝集成大块或很多大小不一的凝血块，红细胞形态改变1+或±的凝集出现小凝集块，视野背景浑浊［3］。我们发现在取凝集块上的红细胞时，极易损伤红细胞，造成溶血，(用生理盐水洗涤红细胞第一次离心后可见上清液呈不同程度的淡红色)。采用抗凝标本的红细胞可避免溶血，正定型实验结果更准确。 用抗凝标本的血浆做ABO反定型影响显著，出现敏钱状凝集，不符率占31%，滴加盐水后大部分能散开，其凝集的原因主要是由于血浆中析出的纤维蛋白网住了试剂细胞中的红细胞出现凝集［3］，干扰试验结果。用不抗凝标本的血清做反定型尽管影响很小，但仍有55%的标本不符，说明这部分标本中仍存在一些纤维蛋白干扰试验。 为了保证血型鉴定的准确性，ABO血型鉴定必须做正反定型。因为第一，两种定型结果可互相验证，使血型鉴定结果更为准确。在血型鉴定过程中，有许多因素可导致错误结果，有些错误结果采用正定型不易发现，如标准血清问题、类B现象、红细胞多凝集或全凝集现象、某些原因的抗原减弱等，用反定型复查可弥补正定型的不足，在正反定型出现不一致时，易于发现和纠正血型错误。第二，可以发现亚型或疾病因素导致血型抗原或抗体的改变。亚型受血者红细胞上抗原弱不易查出，易被误定，但其血清中多含有与其血型相对应的抗体，所以反定型可以防止某些A、B亚型的漏检。在血型鉴定工作中：①采用不抗凝标本，如果正反定型不符时，为排除标本因素造成的影响，可采集另一管抗凝血标本，用抗凝标本的红细胞做正定型，用不抗凝标本的血清做反定型，所用的血清标本需充分凝集，避免一些干扰；②加强实验人员和