- 1、本文档共18页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
QTRAP-IDA指南
IDA指南
Information Dependent Acquisition (IDA)自动关联扫描能够在一个色谱过程中进行MS/MS谱的“on the fly ”采集。Analyst Software IDA通过组合特定的survey scans,高分辨扫描和灵敏的子离子扫描产生大量有用的MS/MS数据。在一个典型的IDA实验中,survey scan产生了一个所有出现离子的峰列表。峰列表根据用户定义的标准除去不想要的母离子。留下的离子则进行MS/MS实验。这个循环在整个采集过程中不断重复,产生了大量的信息丰富的数据。
由于Q TRAPTM System仪器灵活性强,有多种不同的扫描选择,所以IDA功能强大而灵活。多个水平的MS/MS和MS/MS/MS可以以完全自动的方式执行。
IDA实验可以手动方式建立或者借助IDA Wizard帮助。本指南介绍采用这两种方式建立IDA实验。另外还描述了一些用于蛋白质组学的典型方法;蛋白质鉴定的标准方法,在多肽混合物中筛选磷酸化位点的方法。
注意:关于不同扫描方式的更多信息参见Q TRAPTM系统的LIT扫描模式。
6.1 击活硬件Profile
打开导航栏(屏幕的左边)中的Hardware Configuration Editor,选择与MS系统相联的LC系统的合适的硬件配置并击活Profile。这些外围设备将自动加入到IDA方法中,所以必需提前选好。关于硬件Profile更多的信息参见LC Packing System指南或者Agilent capLC 系统指南。
6.2 IDA Wizard
双击导航栏的Acquire部分的IDA Method Wizard,可以登录IDA Wizard。
建立IDA Experiment的窗口如下。
IDA Wizard简化了建立IDA Experiment的过程。Wizard包括了三个IDA Method,可以采用4个survey scans。前两个采用线性离子阱MS扫描作为survey scans,即EMS和EMC扫描,然后击发EPI从属扫描。第三个选择是用三重四极杆建立实验,即用母离子扫描或中性丢失扫描作为survey scans击发EPI从属扫描。(关于不同扫描方式的更多信息参见Q TRAPTM系统的LIT扫描模式,或Q TRAPTM系统的四极杆扫描模式。)
6.3 使用IDA Wizard建立一个蛋白鉴定的IDA方法
第一个介绍的IDA实验是一个典型的蛋白鉴别实验,得到尽可能多的多肽的高质量的MS/MS数据。任何一种LIT MS 扫描都适合这个实验,本实验采用Enhanced MSEnhanced Product Ion scan选择。强烈推荐这类实验中使用Enhanced Resolution Scan。母离子的精确性较好,而且可以精确断定离子的电荷状态。其信息优势远远超过执行该扫描所花费的少量的时间。如下所示两个框均打勾后,点击Next。
在下面的窗口中,Enhanced MS Survey Scan的参数被设定。测定多肽质量数的典型的扫描范围为400-1200amu,在Start mass/Stop Mass窗口输入该质量范围。由于母离子的分辨率将在ER扫描中获得,所以使用最快的扫描速度(4000amu/sec)。最后,LIT fill time默认为20ms,在大多数情况下都是好的设置。但是,如果对于样品有一定的信息,也可以进行调整。如果希望得到数量多的多肽则将fill time减少到10ms。如果需要增加灵敏度则将fill time增加到20-50ms。点击Next继续。
下面的窗口定义Dependent Scan的参数。一般地,每次对最强的1-3个多肽进行MS/MS。如下所示,在窗口上方设定。
EPI实验的碰撞能量(CE)可以通过两种不同的方式设定。选择的每一个母离子可以至多有三个不连续的碰撞能量。例如,如果两个最强的离子被选择,两个不连续的碰撞能量被设定,那么在每次循环中将进行4个独立的EPI扫描。对于蛋白鉴别实验,最好采用Use Rolling Energy 设置每一个多肽的CE值。(Use Rolling Energy将在6.5部分的设置IDA选择标准中描述)。其特点是根据每一个多肽的m/z值和电荷状态计算最优的碰撞能量。
在Start mass/Stop Mass窗口输入扫描范围100-1700。在EPI扫描中采用最快的扫描速度(4000amu/sec),碎片离子仍然可以达到单位分辨。这种扫描方式中, fill time设置为50ms,也可以根据灵敏度的要求进行调整。点击Next继续。
以下描述IDA实验的选择标准。
设定潜在的母离子的质量范围,在For ions greater than 和For ion
您可能关注的文档
- Protel课程设计(甲类功放).doc
- PSPiceLM386报告.doc
- PROTOS(ZJ17)卷烟机公司培训课件.ppt
- PS掉线率优化经验总结1018.ppt
- pspice运算放大器 反馈放大 串联稳压电路.doc
- PTFE物理室各项检测指标.doc
- PTT纤维的产品开发.ppt
- PTH教育训练资料.ppt
- PSA制氮机系统说明书20.doc
- pubEnlishandkingEnglishpara1-4课文讲解.pptx
- 第18讲 第17课 西晋的短暂统一和北方各族的内迁.docx
- 第15讲 第14课 沟通中外文明的“丝绸之路”.docx
- 第13课时 中东 欧洲西部.doc
- 第17讲 第16 课三国鼎立.docx
- 第17讲 第16课 三国鼎立 带解析.docx
- 2024_2025年新教材高中历史课时检测9近代西方的法律与教化含解析新人教版选择性必修1.doc
- 2024_2025学年高二数学下学期期末备考试卷文含解析.docx
- 山西版2024高考政治一轮复习第二单元生产劳动与经营第5课时企业与劳动者教案.docx
- 第16讲 第15课 两汉的科技和文化 带解析.docx
- 第13课 宋元时期的科技与中外交通.docx
最近下载
- 西北工业(大学)数学分析历年考研试题.pdf
- 《Unit 4 Fun with numbers》教学设计外研版(三起)(2024)小学英语三年级上册.docx VIP
- 135战法55种方法图解(宁俊明版).docx VIP
- 小学生主题教育班会 不挑食我最棒 课件(共27张PPT).pptx VIP
- 工贸企业重大事故隐患判断标准解读培训课件.pdf
- 上海市2023年高考语文模拟题汇编-阅读与鉴赏(现代文阅读).doc
- 中国居民膳食指南2022全文.pdf
- 2024年《消费者权益保护法实施条例》全文解读PPT课件.pptx
- 商业商户店铺装修手册.doc
- 新人教版英语七年级上册全册课件(2024年新教材).pptx
文档评论(0)