实验一+目的基因重组与转化2016.pdfVIP

《医学生物学研究技术与实验》 实验课程部分 医学实验教学中心 潘銮凤 lfpan@shmu.edu.cn 1 实验室安全 1. 非选课学生未经许可不得进入实验室，如需旁听，必须得到实验中心 主任许可； 2. 进入实验室必须穿实验服，个人物品可寄存，水杯等放置走廊的层架 上，实验室内不得饮食； 3. 实验结束后，未经许可，不得将实验相关材料带出实验室； 4. 实验过程中产生的废弃物（液）在保证环境友好的条件下丢弃在制定 地方； 5. 实验过程中如发生各种意外情况，需及时处置并在第一时间报告老师。 —— 详见 《医学实验教学中心安全制度》 2 实验课导言 实验安排 实验一：DNA 重组与转化 课程负责人：潘銮凤 实验二：重组DNA提取与鉴定 实验三：细胞总RNA提取及逆转录 授课教师： 实验四：实时荧光定量PCR 潘銮凤 实验五：细胞总蛋白制备及SDS支秀玲（秘书） 实验六：Western Blot 王松梅 实验七、八、九：流式细胞术、共聚焦显微镜 邵红霞 和免疫组织化学 （示教见习，注意时间安排） •5 实验流程图 质粒重组 转化 鉴定 实验一、二 细胞培养 细胞总RNA 的提取及逆转录 浓度测定 real time PCR扩增 实验三、四 细胞总蛋白提取 浓度测定 SDSWestern Blot 实验五、六 •6 温馨提醒 • 女厕在3、5楼西侧；男厕在2、4楼西侧 • 寄包柜密码仅一次有效，再次寄存需重新启动。请保 存好密码单，贵重物品建议随身带好，不要寄存。 • 为实验人员安全考虑，实验室内不得饮食，如有需要 请移步至走廊，食物及水杯等可放置走廊的层架上。 7 3 实验注意事项 1.实验用品 实验用品分组 （3人一组）标记，放于实验桌上。实验开始时 清点；实验结束，请各组同学将用品归于原位，整理好本组 桌面后再离开。要回收的器皿初步冲洗后浸泡在水槽内的盆 中（如玻璃耗材等，有疑问请咨询带教老师） 实验开始前请勿乱翻动！ 每组2个盆，1个桶，分别放冰，液体垃圾，固体垃圾，结束后每组自行清理 2. 实验试剂  常规试剂通常3人一组放在桌上，部分试剂一大桌放一管  需要低温保存的试剂在讲台，需到讲台来加样，特别是酶， 加完及时放回原位  有些常规用试剂（如水，加样buffer ），可室温保存，多次 使用，实验结束不要丢弃 3.