用重组8型腺相关病毒载体介导的乙型肝炎病毒持.PDFVIP

王国婧 等/用重组 8 型腺相关病毒载体介导的乙型肝炎病毒持续感染小鼠模型评价核苷类似物的抗病毒效果 95 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology January 25, 2013, 29(1): 95−106 /cjbcn ©2013 Chin J Biotech, All rights reserved 生物技术与方法 用重组8 型腺相关病毒载体介导的乙型肝炎病毒持 续感染小鼠模型评价核苷类似物的抗病毒效果 1,2* 2* 3 2,4 2 2 1 5 王国婧 ，王刚 ，董小岩 ，田文洪 ，尉迟捷 ，魏国超 ，孟红 ，吴小兵 1 山东省医学科学院基础医学研究所 济南大学 山东省医学科学院医学与生命科学学院，山东 济南 250000 2 中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所，北京 100052 3 北京五加和分子医学研究所，北京 100176 4 吉林大学生命科学学院，吉林 长春 130012 5 北京亦庄国际生物医药投资管理有限公司，北京 100111 王国婧, 王刚, 董小岩, 等. 用重组8 型腺相关病毒载体介导的乙型肝炎病毒持续感染小鼠模型评价核苷类似物的抗病 毒效果. 生物工程学报, 2013, 29(1): 95−106. Wang GJ, Wang G, Dong XY, et al. Assessment of anti-HBV effects of nucleotide analogues on mouse model of chronic HBV infection mediated by recombinant adeno-associated virus 8. Chin J Biotech, 2013, 29(1): 95−106. 摘 要: 探索用重组8 型腺相关病毒载体携带 1.3 拷贝乙型肝炎病毒 (rAAV8-1.3HBV) 介导的HBV 持续感染 小鼠模型评价核苷酸类似物抗病毒药物的抗病毒效果。首先，通过将 rAAV8-1.3HBV 经尾静脉注射到 30 只 C57BL/6 小鼠体内，建立 HBV 持续感染模型并对模型成功率进行检测，将建模成功的 27 只小鼠随机分成 6 组。然后采取灌胃的方式给予不同剂量的抗病毒药物恩替卡韦 (ETV) 及拉米夫定 (LAM) ，每日 1 次，连续 10 d， 后停药 15 d，同时设置生理盐水及空白对照组。其中ETV 分为高剂量 (1.0 mg/(kg ·d)) 和低剂量 (0.1 mg/(kg ·d)) 两组；LAM 分为高剂量 (500 mg/(kg ·d)) 和低剂量 (100 mg/(kg ·d)) 两组。检测给药前后和停药前后小鼠模型 血清中HBV DNA 、HBeAg 和HBsAg 表达水平并比较变化情况。结果发现连续给药 10 d 后，各给药组与生理盐 水组相比，血清中HBV DNA 水平均显著下降，具有统计学差异 (P ＜0.05)。停药 15 d 后，低剂量的ETV 与LAM 两组血清HBV DNA 水平出现反弹，差异存在统计学意义 (P ＜0.05)。在整个实验过程中，各组小鼠血清中HBeAg 和HBsAg 表达水平均未出现明显变化。上述结果表明，ETV 和LAM 能有效抑制模型小鼠中HBV 病毒的复制， 而对HBeAg 和HBsAg 表达水平无明显影响；提示AAV8-1.3HBV 介导的HBV 持续感染小鼠模型制备简单， 成模率高，可有效体现出ETV 和LAM 抗HBV 的作用效果，从而用于核苷酸类似物抗HBV 药物的筛查。 关键词: rAAV8-1.3HBV ，乙型肝炎病毒，小鼠模型，核