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ptglabcomPEI转染试剂
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PEI 转染试剂
产品编号:B600070
包装规格:1mL
产品简介:
PEI (Polyethyleneimine)是一种水溶性高分子聚合物,能将DNA、RNA、寡聚核酸等缩合成带正电
的微粒,这些微粒可以黏合到带有负电荷的细胞表面残基,通过胞吞作用进入细胞,进入细胞之后通过渗
透压的改变,PEI 与DNA 聚合物被释放出来,DNA 就可以自由融合到细胞核中。
Proteintech 研发的PEI 转染试剂具有毒性小,转染效率高,操作简便等优点。可根据需要选择6 孔
板,12 孔板,24 孔板等不同体系进行转染实验。
保存条件:
o
4 C 保存,一年有效。
使用说明:
1. 实验前一天细胞铺板,以 6 孔板为例,每个孔加入 1.5mL 培养基(建议使用无抗生素的培养基),根
6
据细胞生长速度,每个孔约0.2-1x10 个细胞,保证在转染之前,细胞达到70%-80%的密度。
2. 准备两支 1.5mL 洁净无菌 EP 管,分别加入250μL 无血清培养基,再将4μg DNA 和5μL PEI 转染试
o o
剂分别加入 EP 管中,37 C 孵育 5 分钟。然后将 PEI 缓慢加入到 DNA 中,轻轻混匀,37 C 孵育 15
分钟,无需更换培养基。最后将500μl 的PEI 和DNA 复合物均匀加入到6 孔板中,轻轻晃动6 孔板,
使复合物尽量分布均匀。
3. 24 小时后即可收集细胞,或者加入G418 进行稳定细胞株的筛选。
4. 根据不同的实验需求,可按照下表选择转染体系:
6 孔板 12 孔板 24 孔板
铺板的细胞数目 0.2-1×106 0.1-0.5×106 0.5-2.5×105
培养基体积 1.5mL 0.75mL 0.4mL
DNA 4μg 2μg 1μg
PEI 5μL 2μL 1μL
培养基总体积 2mL 1mL 0.5mL
注:为了获得更好的转染效率,以6 孔板的一个孔为例,DNA 的用量可以在2-4μg进行调整,PEI 的用量
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