现代分离方法与技术第6章 色谱分离原理.ppt

保留值的碳数规律方程 反相色谱三元或四元流动相体系的保留值方程 Gidding对Van Deemter方程的修正 考虑流动相的线速度影响涡流扩散向和传质阻力相，形成一种微湍流，这种微湍流可能大大加快粒子之间的溶质的迁移。当流动相的线速度提高时，粒子间的传质阻力会降低；当流动相的线速度降低时，粒子间的传质阻力便会加大。 折合参数 折合参数 柱外效应 速率理论研究了色谱柱内溶质区带扩展、板高增加的因素。实际上柱外还存在着引起区带扩展的因素-柱外效应。 色谱区带扩展的总方差，等于柱内、柱外各种独立因素方差之和： 色谱峰体积Vp： 由检测器引起的扩展方差 等温线的影响 以溶质在固定相中的浓度对其在流动相中的浓度作图，将是一条直线，其斜率等于分配系数。由于这条直线是在相同温度下获得称为等温线。 峰形模型 曲线拟合（EMG）：通过计算机或人工方法对峰轮廓进行拟合，进行拖尾峰的处理。 色谱分离的好坏，需要一个评价指标，即最优化指标(optimization index). 1. 色谱响应函数CRF(chromatographic response function) 2. 色谱优化函数COF(chromatographic optimization function) 色谱柱的峰容量(peak capacity) 对给定色谱系统和操作条件，在一定时间内，最多能从色谱柱洗脱出达到一定分力度的色谱峰个数。 ③ 键合固定相对不太强的酸及各种极性的溶剂都有很好的化学稳定性和热稳定性。 ④ 固定相柱效高，使用寿命长，分析重现性好。 3 液-固吸附色谱法(LSAC) 一般也把吸附色谱法称为液固色谱法。液固色谱法的固定相一般为固体吸附剂，常用的是：碳酸钙、硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭等。其中硅胶最为常用。 吸附色谱对中等分子量的油溶性样品可获得最佳的分离，而对强极性或离子型的样品，有时会发生不可逆吸附，不能得到满意的结果。 （1）基本原理 吸附剂一般为多孔性的物质，在它们的表面存在着分散的吸附中心，溶质分子和流动相分子在吸附剂表面的活性中心上进行竞争，同时不同溶质之间和同一溶质的不同官能团之间液也存在竞争。竞争的综合结果就是形成不同溶质在吸附剂表面吸附、解吸平衡。 X：表示溶质分子，下标m为流动相，s为固定相 M：表示流动相分子，下标m为流动相，s为固定相 N：为被溶质分子取代的流动相分子数目 用一个式子表示如下： 吸附平衡常数Kad： 直线型 凸线型 凹线型 三种吸附等温线和对应的色谱峰形状 正常峰 拖尾峰 前伸峰 极性吸附剂上有机化合物的保留顺序如下： 氟碳化合物＜饱和烃＜烯烃＜芳烃＜有机卤化物＜醚＜硝基化合物＜腈＜叔胺＜酯醛酮＜醇＜伯胺＜酰胺＜羧酸＜磺酸 液相色谱的主要类型 1 液-液分配色谱法 2 化学键合相色谱法 3 液-固吸附色谱法 4 离子交换色谱法 5 离子色谱法 6 离子对色谱法 7 尺寸排阻色谱法 8 亲和色谱法 1 液-液分配色谱法 液液色谱又称液液分配色谱。 在液液色谱中，一个液相作为流动相，而另一个液相则涂渍在很细惰性载体或硅胶上作为固定相。流动相与固定相应互不相溶，两者之间应有一明显的分界面。分配色谱过程与两种互不相溶的液体在一个分液漏斗中进行的溶剂萃取相类似。以气液分配色谱法一样，这种分配平衡的总结果导致各组分的差速迁移，从而实现分离。分配系数（K）或分配比（k）小的组分，保留值小，先流出柱。然而与气相色谱法不同的是，流动相的种类对分配系数有较大的影响。 1 液-液分配色谱法 一、固定相 液液色谱的固定相由载体和固定液组成。常用的载体有下列几类： （1）表面多孔型载体（薄壳型微珠载体），由直径为30~40?m的实心玻璃球和厚度约为1~2 ?m的多孔性外层所组成。 （2）全多孔型载体，由硅胶、硅藻土等材料制成，直径30~50 ?m的多孔型颗粒。 （3）全多孔型微粒载体，由nm级的硅胶微粒堆积而成，又称堆积硅珠。这种载体粒度为5~10 ?m。由于颗粒小，所以柱效高，是目前使用最广泛的一种载体。 1 液-液分配色谱法(LLPC) 由于液相色谱中，流动相参与选择作用，流动相极性的微小变化，都会使组分的保留值出现较大的差异。因此，液相色谱中，只需几种不同极性的固定液即可。如?，?? —氧二丙腈（ODPN），聚乙二醇（PEG），十八烷（ODS）和角鲨烷固定液等。 二、流动相 在液液色谱中，除一般要求外，还要求流动相对固定相的溶解度尽可能小，因此固定液和流动相的性质往往处于两 个极端，例如当选择固定液是极性物质时，所选用的流动相通常是极性很小的溶剂或非极性溶剂。 1 液-液分配色谱法 以极性物质作为固定相，非极性溶剂作流动相的液液色谱，称为正相分配色谱，