CCR5基因转染对骨髓源神经干细胞生物学行为的影响_胡昱.pdfVIP

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2012, 34(10): 976–982 http ://www.cj CCR5基因转染对骨髓源神经干细胞 生物学行为的影响 胡　昱　郝海光　张晓丹　赵　丹　孙　东　杨静娴* (辽宁中医药大学药学院, 大连116600) 摘要 骨髓源神经干细胞(bone marrow-derived neural stem cells, BM-NSCs)具有自我更新和 分化为神经元与神经胶质细胞的潜能, 可用于修复治疗多种神经系统退变与损伤性疾病。但由于 其表面缺乏趋化因子受体, 移植后向中枢病变部位迁移的速度较慢, 疗效欠佳。该研究构建了趋化 因子受体CCR5基因, 并转染BM-NSCs, 用免疫荧光细胞化学法、流式细胞仪法及Boyden 小室细胞 趋化实验, 体外研究了CCR5高表达对BM-NSCs增殖、分化与迁移能力的影响。结果表明, CCR5高 表达能显著增强BM-NSCs的趋化能力, 而不影响其自我更新和分化为神经元与神经胶质细胞的能 力, 说明其植入体内后可保持细胞替代与神经修复作用, 并能快速大量迁移到病灶部位, 显著增强 疗效。 关键词 骨髓源神经干细胞; 趋化因子受体CCR5; 增殖; 分化; 迁移 神经干细胞(neural stem cells, NSCs)是一类具 位[3-6], , 起效缓慢 疗效欠佳。 , 有自我更新和神经系分化潜能的细胞 能分化为神 为了提高BM-NSCs 的迁移能力以增强治疗效 , , , CCR5 , 经元和神经胶质细胞 替代修复损伤的神经组织 为 果 本研究构建了趋化因子受体 质粒 并转染 多种神经系统退变与损伤性疾病的治疗带来了希 BM-NSCs, 体外研究了CCR5高表达对BM-NSCs增 [1] , 望 NSCs 殖、分化与迁移能力的影响 为其能成为集细胞替 。但目前用于移植的 主要来源于胚胎或成 , , 代与基因治疗为一体的理想种子细胞提供实验依 体动物的脑组织 取材困难、损伤较大 胚胎来源的 NSCs , 据。 无法回避免疫排斥及道德伦理等问题 降低了 , 临床使用的可行性。目前 寻找取材安全方便、来 源丰富稳定且能快速有效发挥治疗作用的新型神经 1 材料与方法 干细胞具有重要的意义。 1.1 材料 骨髓间充质干细胞具有较强的增殖与分化能 1.1.1　动物 C57BL/6小鼠购于大连医科大学实 [1-2] , , , : SCXK( )2008-0002 力