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HSV_1作用于KSHVORF5_省略_动子区中特异性应答位点序列的初寻_程伟
第 卷第 期 南京医科大学学报( 自然科学版)
31 5
年 月 ( )
2011 5 ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING Natural Science · ·
595
HSV-1 作用于KSHV ORF50 启动子区中特异性应答位点序列的初寻
1 1 1 * 1
程 伟,郝婷婷 ,王子盾,朱小飞 ,冯宁翰,华立新,秦 娣 ,卢 春
1
(南京医科大学第一附属医院泌尿外科,江苏 南京 210029 ; 南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏 南京 210029 )
[摘 要] 目的:构建卡波济肉瘤相关疱疹病毒( ’ , ) 启动子系列截短序列克
Kaposi s sarcoma-associated herpesvirus KSHV ORF50
隆, 初步寻找 作用于 启动子区中特异性应答位点序列。 方法: 以 基因组为模板, 扩增
HSV-1 KSHV ORF50 KSHV PCR KSHV
ORF50 启动子系列截短序列,克隆至含有虫荧光素酶(Luciferase )报告基因的基本载体pGL-3 中,构建含ORF50 启动子系列截短
序列的重组 报告质粒。 系列重组报告质粒经酶切鉴定和序列测定分析后,分别转染单纯疱疹病毒 型( )感染后
Luciferase 1 HSV-1
的非洲绿猴肾细胞(Vero 细胞),进行 Luciferase 活性检测,计算并比较相对Luciferase 活性单位(Relative luciferase activity unit ,
)。 结果:成功分离、克隆 启动子系列截短序列; 感染随后转染重组质粒 、 和 与转染
RLU KSHV ORF50 HSV-1 p50-95 p50-46 p50-17
、 、 及 相比, 细胞中 活性显著下降。 结论:成功构建了含 启动子系列
p50-1500 p50-750 p50-375 p50-185 Vero Luciferase KSHV ORF50
截短序列的重组 报告质粒;
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