PCR介导的定点突变与随机突变的应用.pdf

第 卷第 期 43 9 山 东 大 学 学 报 医 学 版 Vol.43No.9 ( ) 年 月 ( ) 2005 9 JOURNALOFSHANDONGUNIVERSITYHEALTHSCIENCES Sept.2005 文章编号: 1671-7554(2005)09-0865-03 PCR介导的定点突变与随机突变的应用 , 任桂杰12,王志玉1 山东大学 公共卫生学院病毒学研究室 医学院生化与分子生物学研究所 山东 济南 ( ) 1. ;2. , 250012 关键词 聚合酶链反应；定点突变；随机突变 [ ] 中图分类号 文献标识码 [ ] Q754 [ ]B 蛋白质的结构与其功能之间的关系是蛋白质 缓冲液混合 否则会导致沉淀产生 妨碍 PCR , , PCR 组学研究的重点内容之一 体外突变技术是研究 反应 。 )。 这种复杂关系的有力工具 也是实验室中改造 优 定点突变引物 两对引物 共 个 每 , / 1.1.3 ① ( 4 ), [1] 化基因常用的手段 定点突变技术可对某个已知 对引物分别用于各自 反应 每一引物约含有 。 PCR 。 基因的特定碱基进行定点改变 缺失或者插入 随 个与另一对引物中相应引物互补的核苷酸 、 ; 24 ;② 机突变则可在特定编码序列的多个位点上产生随 测序引物 在突变部位或插入部位的两侧 用于分 , , 机的突变体 我们现介绍两种在实验中总结出来 析生成的构建体 所有引物均由上海生物工程有 。 。 的用PCR方法对克隆化DNA进行定点突变和随 限公司合成。 机突变的技术。 1.2 方法 [2] 1.2.1 定点突变方法 重组PCR进行定点突变 的过程见图 引物由带数字的箭头表示 突出部 1 材料与方法