兔颈动脉球囊成形术促进白细胞介素6和超敏C反应蛋白的表达.docVIP

兔颈动脉球囊成形术促进白细胞介素6和超敏C反应蛋白的表达 王正龙，石 蓓 （遵义医学院第一附属医院心血管内科，贵州 遵义 563003） 经皮冠状动脉内血管成形术(percutaneous coronary intervention，P)广泛应用于心绞痛或心肌梗死的治疗并取得了显著疗效，6个月通常有10%～30%的患者出现再狭窄(restenosis，RS)，，[1]，然而目前尚没有灵敏度和特异性较高、能够有效反映血管损伤严重程度的实验指标。本研究即是通过建立血管损伤模型，观察球囊扩张前后血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)和白细胞介素6(IL-6)水平的变化，观察其与血管损伤程度及再狭窄的关系。 1 材料与方法 1.1 实验动物与分组 36只新西兰雄性大白兔，体质量（2.0±0.5）kg，根据球囊损伤程度分为3组，轻度球囊损伤组（n=12）：用2个大气压行颈动脉球囊扩张；重度球囊损伤组(n=12)：用8个大气压行球囊扩张；假手术组（n=12）：方法同球囊损伤组，但不使用球囊损伤颈动脉。 1.2 球囊损伤血管模型的制作 建立球囊损伤血管模型方法参见Makiyama等[2]。 1.3 模型鉴定 分别从3组中抽取兔3只，于术后即刻从兔耳缘静脉按0.1ml/100g推注0.5%的伊文思蓝，1h后处死动物，取损伤的右颈总动脉观察内膜情况；术后28d处死兔，迅速取出球囊损伤部位的颈动脉, 每段长6～10mm, 置于4%多聚甲醛溶液中固定24h,酒精脱水,石蜡包埋,连续切片5张(片厚5μm), 行HE染色，封片, 在光学显微镜下及利用Q1000W计算机图计算机图像分析系统观察管腔大小、内膜增生、血管狭窄情况。 1.4 实验指标检测 3组均分别于术前，术后1、7d和28d抽血行hs-CRP与IL-6测定；IL-6采用ELISA法测定，hs-CRP采用免疫浊度法测定。 1.5 统计学方法 用SPSS 13.0软件进行数据分析。计量资料用±s 表示，t检验，t检验。 2 结果 2.1 球囊损伤模型建立结果 2.1.1 伊文思蓝染色 不同压力的球囊对颈动脉内膜损伤程度不同，内膜被伊文思蓝染色的结果有差别，轻度球囊损伤组内膜被染成蓝色，但不均匀；重度球囊损伤组内膜被染成较均匀蓝色；假手术组内膜未被染色。 2.1.2 病理检查及图像分析结果 模型建立后28d，病理检查见重度球囊损伤组内膜增生明显，轻度球囊损伤组见轻度的内膜增生，假手术组未见内膜增生(图1)。病理图像分析：与假手术组比较，球囊损伤组颈动脉的新生内膜面积、内膜厚度明显增加（P0.05），重度球囊损伤组高于轻度球囊损伤组（P 0.05）；管腔面积明显减少（P0.05），重度球囊损伤组低于轻度球囊损伤组(P 0.05，表1）。 2.2 hs-CRP与IL-6结果 2.2.1 血清hs-CRP结果 术前3组血清hs-CRP水平无统计学差异（P﹥0.05）；hs-CRP水平呈显著性升高（P 0.05），且重度球囊损伤组显著高于轻度球囊损伤组（P 0.05）；术后28d，血清hs-CRP水平基本恢复正常，其在3组间比较差异无统计学意义（P﹥0.05，表2）。 2.2.2 血清IL-6结果 术前3组血清IL-6水平无统计学差别（P﹥0.05）；IL-6水平均呈显著性升高（P 0.05），且重度球囊损伤组显著高于轻度球囊损伤组（P 0.05，表3）。 表1　3组血管指标结果比较(±s) 组别 内膜厚度 管腔面积 新生内膜面积 (μm) (sqμm) (sqμm) 假手术组 6±2 9948±152 0 轻度球囊损伤组 72±10 a 6228±128 a 2464±173 a 重度球囊损伤组 134±12 b 2276±137 b 6846±218 b a：P0.05，与假手术组和重度球囊损伤组比较；b：P0.05，与轻度球囊损伤组比较 A：轻度球囊损伤组；B：重度球囊损伤组；C：假手术组 图1 不同程度球囊损伤血管内膜增生病理观察（HE×200） 表2　3组术前及术后hs-CRP水平的比较(mg/L ，±s） 组别 例数 术前 术后 1d 7d 28d 假手术组 9 4.46±0.75 18.91±3.53 14.76±2.26 5.14±0.83 轻度球