鼠抗人2IgB7-H3功能性单克隆抗体的研制和其生物学功能的初步研究.pdfVIP

鼠抗人219BT-H3功能性单克隆抗体的研制及其生物学功能的初步研究 中文摘要 I 鼠抗人2gB7-H3功能性单克隆抗体的研制 及其生物学功能的初步研究 中文摘要 B7-．H3分子是最新发现的B7家族的新成员，属于B7超家族成员，为I型跨膜 跨膜区、胞浆区及信号肽区．B7-H3mRNA有较广泛的组织表达谱，在某些恶性肿 瘤细胞上也有较高的表达，其相应的受体尚未发现，有文献报道，BT-．I-13对T细胞 存在两种不同的效应：刺激或者抑制效应．B7．H3能够刺激T细胞的增殖，使CTL的 异构体，其表达的差异及生物学意义尚需深入研究。目前本校医学生物技术研究所 分子2IgB7．．I--13的特异性单抗更加有助于该共刺激信号学功能的研究，并且在肿瘤免 疫及自身免疫性疾病的治疗中均具有潜在的应用价值。本研究成功研制了一株新的 鼠抗人2IgB7．H3功能性单克隆抗体7D7，并对其生物学特性及生物学功能做了初步 功能，将为理解BT-H3分子在信号调节途径、免疫应答提供新的研究视角，具有一 定的应用前景。 mAb，研究B7-H3在DCs上 关生物学特性的鉴定；利用自主研制的抗人21987-H3 隆抗体的肿瘤细胞表达谱的生物学差异和单抗71)7在肿瘤免疫中的生物学作用。 m．抚A．219aT-m功能性单克隆抗体的研铷及其生物学功蝗塑塑塑塑壅 中文摘要 疫原免疫Balb／C小鼠；(2)采用B淋巴细胞杂交瘤技术将免疫小鼠的脾脏细胞与小 通过间接免疫荧光标法对杂交瘤细胞株进行筛选；(4)单抗标记生物素，通过竞争 抑制试验检测单抗识别抗原位点的情况；(5)采用常规方法制备染色体，分析杂交 瘤细胞核型；(6)采用免疫亲和层析纯化腹水型单抗；(7)快速试纸鉴定单抗类型；(8) 采用间接免疫荧光标记法测定单克隆抗体的效价，并检测对比两种单抗在不同肿瘤细 胞株和细胞上的表达；(9)免疫组织化学检测单抗对肝硬化组织、肝癌组织、癌旁组 情况．利用MTr法，研究B7-H3信号途径在成熟DC体外活化T细胞过程中的作用； mAb的杂交瘤 实验结果：(1)成功获得一株稳定分泌特异性鼠抗人2IgB7-H3 型分析提示该株杂交瘤是融合体细胞；(4)腹水型单抗7D7的效价是l：1000；(5) Protein 21D4(；a}：校医学生物技术研究所已制备)识别完全不同的抗原表点；∽单抗7D7可以特 有的上皮来源的肿瘤细胞株上都有表达，而在其他来源的组织上却很少检测到 和卵巢癌细胞株上可以检测到高2iga7-m的高表达；(9)免疫组织化学检测结果提示， 某些肝硬化组织和癌旁组织能表达2IgB7-m，但在肝癌细胞上却不表达；(10)鼠抗 人21#7-m功能性单克隆抗体7I)7可以明显地抑制成熟Dc对T细胞的促增殖作用， 发现，单抗7I)7还具有显著抑肿瘤细胞体外增殖的作用。 II 鼠抗人2IgB7-H3功能性单克隆抗体的研制及其生物学功能的初步研究 中文摘要 结论：抗人2IgB7-H3单克隆抗体的制各为深入探讨B7．H3信号通路在肿瘤免 疫应答和机体的体液免疫的重要作用奠定了良好的物质基础。 关键词： B7-H3；杂交瘤；单克隆抗体：表达谱，DCs；肿瘤细胞 2003级硕士研究生：饶爱华 导 师：周迎会 吴士良 鼠抗人2IgB7-m功能性单克隆抗体的研制及其生物学功能的初步研究 英文摘要 ofamouseanti—-human monoclonal Preparation 2IgB7-·H3 andthebasic onits fun