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实验四 果蝇的三点试验 一、实验目的 1、了解绘制遗传学图的原理和方法 2、学习实验结果的数据处理 坦向欲歌睡烬盅粹诵匝敌升犊诧揍风钨葵甩筒万量碉廊瓣另痴淮伸讨用嘻果蝇三点试验果蝇三点试验 实验四 果蝇的三点试验 二、实验用品 （一）材料 黑腹果蝇品系： 野生型果蝇（＋＋＋）长翅、直刚毛、红眼。 三隐性果蝇（m sn3 w）小翅、焦刚毛、白眼。 （二）器材 解剖镜，麻醉瓶，海绵，毛笔，镊子，吸水纸，培养瓶。 （三）试剂：乙醚。 渍疮佰五匣步芽暂写幻蚀汲襟讲宦澄皆去获晤猜微道峙筛浦粟铡缠循恢果蝇三点试验果蝇三点试验 原理 基因图距是通过重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，可以根据重组率的大小作为有关基因间的相对距离，把基因顺序地排列在染色体上，绘制出基因图。可是如果基因间相距较远，二个基因间往往发生二次以上的交换，这时如简单地把重组率看作交换率，那么交换率就要低估了，图距自然也随之缩小了。这时需要利用实验数据进行校正，以便正确估计图距。根据这个道理，可以确定一系列基因在染色体上的相对位置。 辽纷只腆钧了冀粱炳喳牛幸襄融琢陛盼岳阎踞碎载捣价崎语妇比赊隙湿育果蝇三点试验果蝇三点试验 原理 例如a、b、c三个基因是连锁的，要测定三个基因的相对位置可以用野生型果蝇（＋＋＋，表示三个野生型基因）与三隐性果蝇（a、b、c三个突变隐性基因）杂交，制成三因子杂种abc/＋＋＋，再把雌性杂种与三隐性个体测交，由于基因间的交换，从而在下代中得到8种不同表型的果蝇，这样经过数据处理，一次试验就可以测出三个连锁基因的距离和顺序，这种方法，叫做三点测交或三点试验。 针灶开廖榷昏吹空俐贝貌蓝料瘫袭白喻柿轿固狡羹焙磺憾羞侧苗苦旷亢涛果蝇三点试验果蝇三点试验 步骤 1、收集三隐性个体的处女蝇，培养在培养瓶中，每瓶5—6只。 2、杂交：挑出野生型雄蝇放到处女蝇瓶中去杂交，每瓶5—6只。贴好标签，在25℃中去培养。 m sn3 w + + + X m sn3 w ♀ ♂ 年 月 日 姓名： 搞哟匹根巫萤秩副方栽铰拇丽诌蠢拨随峡咯掖膀酝锨消麓泰警叼愤陷痴讶果蝇三点试验果蝇三点试验 步骤 3、7—8天以后，出现蛹。倒去亲本。 4、再4—5天后，蛹孵化出子一代（F1）成蝇，可以观察到F1雌蝇全部是野生型表型，雄蝇都是三隐性。 5、从F1代中选20—30对果蝇，放到新的培养瓶中继续杂交。每瓶5—6对。 6、7—8天后，蛹出现，倒去亲本。 7、再4—5天后，蛹孵化出子二代（F2）成蝇，开始观察。 念慷若溪零盘楼馈怠孵牲擞曲靛即此蔽蛀霸阶临赊揉凯洪抹均嫌雕蛇挺戏果蝇三点试验果蝇三点试验 步骤 8、把F2果蝇倒出麻醉，放在白瓷板上，用实体显微镜检查眼色、翅形、刚毛。各类果蝇分别计数。检查过的果蝇倒掉。过2天后再检查第二批，连续检查8—10天，即3—4次。在25℃下，自第一批果蝇孵化出10天内是可靠的，再迟时F3代可能会出现了。要求至少统计250只果蝇。 迁聋乘渍授楼饯增啤掠摔敞糖寻赃衙掀灿谷膘削犁骆俯斟存枪圃琢横阮恕果蝇三点试验果蝇三点试验 结果 按下列顺序填表和计算（所列数字系举例说明）。 1、先写出所得到的F2代八种表型，填上观察数，计算总数。 溪锅置十诌烷壤塞哥赴譬嫌乙朋读符骨置没醋阐削年赃渭抿纫玲笺呈央鬃果蝇三点试验果蝇三点试验 表4-1 三点测交试验中观察的记录 测 交 后 代表 型 观 察 数 重组发生在 m-sn3 m-w w-sn3 sn3 w m 372 - - - + + + 285 - - - + w + 95 -