液相色谱-串联质谱法测定饮用水中的丙烯酰胺.docVIP

液相色谱-串联质谱法测定饮用水中的丙烯酰胺 张凌云1 刘波1 徐荣1 卢益新1 谭美凌1 赵宇1 伍子同2 （1 深圳市水务集团水质监测站 深圳 518000; 2 武汉理工大学理学院化学系 武汉 430070） 摘要 建立了用液相色谱-串联质谱法测定饮用水中丙烯酰胺的方法。该法使用Cole-Parmer PTFE滤膜过滤样品，采用Acquity HSS T3(1.8μm,2.1X50mm)柱分离，以0.1%甲酸和甲醇为流动相（体积比95：5）分离。采用UPLC/MS/MS电喷雾电离正离子模式（ESI+），多反应检测（MRM），以外标法定量分析。该方法在0.10μg·l-1到0.60μg·l-1有良好线性范围。最低检测下限（LOD）0.10μg·l-1。加标回收率范围为88.9%-106.7%。相对标准偏差均低于8.2%。方法适用与水中丙烯酰胺的测定，具有灵敏度高、重现性好的特点，在水质监测中有重要作用。 关键词 质谱,LC/MS/MS,丙烯酰胺,饮用水,外标法。 1 引言 丙烯酰胺（Acrylamide）是一种水溶性小分子白色结晶状固体（图1），溶于水，乙醇等极性有机溶剂，是聚丙烯酰胺的单体。聚丙烯酰胺在水处理中用作絮凝剂，在饮用水的处理中有助于水的澄清。丙烯酰胺已被国家癌症中心（IARC）列为IIA类致癌物[1]，它的α，β-不饱和氨基系统非常容易与亲核物质通过迈克尔加成（Michael addition）l-1 [5].因此，有必要建立一种合适的测定方法以检测饮用水中的低含量丙烯酰胺。丙烯酰胺极性很强，在常温下易分解[6]。目前，国内外测定痕量丙烯酰胺的方法主要有高效液相色谱法、气-质联用法及衍生化法[7-9],但不适用于测定水中的丙烯酰胺。而测定水中痕量丙烯酰胺有液相色谱-串联质谱联用法[10]、高效液相色谱法[7]。但是这些方法测定步骤繁琐、灵敏度低、不能满足大多数实验室的检验要求。 本论文陈述了使用液相色谱-串联质谱法测定饮用水中的丙烯酰胺的方法，该法有前处理简单、测定周期短、灵敏度高、重现性好等优点。 图1 丙烯酰胺的结构式与化学性质 Fig.1 Chemical structure and properties of acrylamide 2 实验部分 2．1实验仪器、试剂与样品 2．1．1 仪器 Waters Acquity 超高液相色谱仪(配备自动进样器、二元梯度泵)；Acquity HSS T3(1.8μm,2.1X50mm)色谱柱；Micromass Quattro Premier XE四级杆串联质谱仪；Barnsted超纯水器；AND AF-2000十万分之一电子天平。 2．1．2 试剂 纯水制备自Barnsted超纯水器，电导率为18.2MΩ,TOC0.2PPM,并去热源；丙烯酰胺固体标准品购自Cxbio Biotech.；丙烯酰胺液体标准品浓度1000μg·ml-1，溶剂为甲醇，购自美国百灵威；甲醇（HPLC级，德国Merck公司） 2．2 实验条件 2．2．1 色谱条件 　　色谱柱：Waters Acquity HSS T3(1.8μm,2.1X50mm);柱温：30℃；流动相：甲醇-水（0.1%甲酸），体积比5：95；进样量10μl；流速：0.25ml·min -1。 2．2．2 质谱条件 　　离子源：ESI+模式；毛细管电压：3.50kV;锥孔电压：20V;二级锥孔电压：5V;源温：120℃;脱溶剂温度：350℃；脱溶剂气流速：400L·h-1；定量方式为多反应检测（MRM）模式，定量离子为丙烯酰胺（71.654.8）,定性离子为丙烯酰胺（71.643.9），碰撞能量均为8eV。 2．2．3 样品预处理 　　分析前，样品于4℃避光保存。分析时，样品用Cole-Parmer PTFE 0.2μm滤膜过滤。 2．2．4 定性及定量 选择m/z71.654.8作为样品的定量离子，m/z 71.643.9作为样品的定性离子；以m/z 71.654.8的峰面积比对丙烯酰胺的质量浓度作标准曲线。以保留时间和m/z71.643.9的响应强度比作为定性标准。 3 结果与讨论 3．1实验条件优化 3．1．1 液相色谱条件的优化 　　丙烯酰胺有较强的水溶性，因此选择纯水作为主要流动相，为了增加电离效果可以加入少量甲酸，但甲酸加入后会改变流动相PH值，酸性太强会大大降低色谱柱的使用寿命，因此选择0.1%的甲酸水溶液作为主要流动相。但须注意甲酸溶液必须临用新配并密封放置半小时后使用。实验对比研究BEH C18（1.7μm 2.1X50mm）柱与Acquity HSS T3(1.8μm,2.1X50mm)柱在分离度与灵敏度上的差异，发现采用Acquity HSS T3(1