人胎胰腺发育过程中转化生长因子-β1的表达及意义.pdfVIP

广东医学 2013年 11月 第34卷第21期 GuangdongMedicalJournalNov．2013，Vo1．34，No．21 · 3259 · 人胎胰腺发育过程 中转化生长因子 一p 的 表达及意义 冰 赵豫凤 ，艾庆燕 ，刘广忠 ，杨加周 ，王艳梅 ，米志宽 ，苗乃周 延安大学医学院 组胚教研室；病理生理学教研室(陕西延安 716000)；延安大学附属医院内科 (陕西延安 716000) 【摘要】 目的 观察转化生长因子一p (TGF—B)在人胚胎胰腺发育过程中的表达变化，探讨其在胰腺发 育中的作用。方法 采用HE染色和 SP免疫组织化学法检测TGF—B 在不同胎龄 (12、16、20、24、28、32周)胰腺 的胰岛、腺泡、导管中的表达变化。结果 在胚胎胰发育的各个阶段均有TGF—p 的表达，随着胎龄的增长其表 达是 由少到多再减少，胰岛中部分细胞呈强阳性表达，24周达高峰，24周组与其他各组间比较差异有统计学意义 (P0．01)。腺泡、导管中阳性细胞呈弱阳性表达，阳性细胞分别为24、28周最多，导管中28周组与其他各组间 比较差异有统计学意义(P0．01)。结论 TGF—p。在人胎胰腺发育过程 中内、外分泌部均有不同程度的表达， 并且表达量与胎龄有关，表明其在胰腺发育过程 中起着一定的作用。 【关键词】 胰腺；转化生长因子一p】；人胚胎；免疫组化 胚胎发育是从一个受精卵发育成为新个体的特殊 染色试剂盒、生物素化羊抗兔 IgG均购于上海蓝基生 的生理过程，在此过程中，细胞不断增殖、分化和凋亡， 物科技有限公司；DAB显色剂盒购 自北京中山金桥生 最终形成具有各 自形态结构、生理功能的器官和系统。 物技术有限公司。 在决定细胞命运的过程中受到各种生长因子或相关基 1．2．2 SP法免疫组化染色 组织切片常规脱蜡 ，3％ 因的调节 与控制，转化生长 因子 一 。(transforming 双氧水室温孵育 15min消除内源性过氧化物酶，0．01 growthfactor—betal，TGF— )是具有多种功能 的细 mol／L柠檬酸缓冲液 (pH=6．0)中微波修复抗原 1O 胞生长因子，在细胞分化的所有 阶段很多细胞及组织 rain，自然冷却，5％正常山羊血清室温封闭15min后不 都产生 TGF—p，，属于多肽型信号分子 ，通过其受体可 洗，滴加一抗 (1：100)4~C过夜 ；恢复室温40rain，滴加 以调节细胞的增殖、分化、迁移 、黏附、凋亡等过程 ，在 生物素化羊抗兔 IgG(1：100)37℃孵 1h，加辣根过氧化 胚胎生长和器官发育中发挥着重要的调节作用…。以 物酶标记链霉卵 白素孵育 15rain，以上各步骤间用 往的研究主要集中于它在肿瘤发生发展的作用，对胚 0．O1mol／L(pH=7．4)PBS振荡洗 2次，5min／次；加 胎发育正常生理过程研究很少。本研究用免疫组织化 DAB显色液3—5min，终止反应，双蒸水充分洗涤；苏木 学法 ，对30例人胚胎胰中TGF—p在胰岛、腺泡、导管 精复染 1～3rain，常规脱水，透明，中性树胶封片。用 的表达进行了检测，了解其在不同胎龄胰中表达的差 0．1mol／L(pH=7．4)PBS代替一抗作为阴性对照，其余 异性 ，探讨其生物学意义，为胚胎胰腺发育规律提供形 步骤相同。结果用PrimoStar型数码显微镜 (购于麦克 态学资料。 奥迪实业集团有限公司)观察并照像，经随机分组设计， 1 资料与方法 在放大倍数400倍情况下，每张切片连续观察5个高倍 1．1 一般资料 收集2010年 1月至2012年 12月曾 视野，每个高倍视野计数阳性细胞数和阴性细胞数。 在延安大学附属医院就诊，因故必须终止妊娠的正常 1．3 统计学方法 采用 SPSS13．0统计软件进行完 胎儿3O例 ，两性兼有，均征得孕妇或其家属同意，并留 全随机设计资料方差分析。 有书面记录，孕妇健康。根据孕妇停经史、胎儿大小、 2 结果 体积与发育关系等综合指标