食蟹猴单个核淋巴细胞体内荧光示踪方法的建立.pdfVIP

· 3456 · 广东医学 2014年 11月第 35卷第22期 GuangdongMedicalJournal Nov．2014，Vo1．35，No．22 食蟹猴单个核淋巴细胞体 内荧光示踪方法的 建—L：}： 程佩伦 ，钟利民，蒋泽生，汪艳 ，高毅，潘明新 南方医科大学珠江医院肝胆外科 (广J,i4510282) 【摘要】 目的 建立食蟹猴单个核淋巴细胞体 内荧光示踪方法。探索该方法的细胞采集途径、细胞输注部 位和流式检测技术参数。方法 从外周血和腋窝淋巴结分别提取分离出单个核淋巴细胞，经CFSE染色后分别将 荧光细胞输注食蟹猴外周血和手掌大鱼际下；经过 1、2、3h后从外周血和淋 巴结再次提取其中的单个核淋 巴细 胞，用流式细胞仪检测此样本中荧光细胞数量比例，并优选染色浓度、时长和流式检测技术参数。结果 CFSE最 佳染色浓度为 1~moWL，最佳染色时长为 15min；细胞悬液输注 1、2、3h后血管通道组中荧光细胞比例平均值依 次为2．37％、0．48％、0．O1％，而淋巴管通道中荧光细胞比例显著高于血管通道，平均值依次为 12．77％、3．31％、 0．07％。结论 使用淋巴管道 系统进行淋巴细胞的采集示踪，与传统的从血液 系统示踪方法比较，可以显著提高 可监测靶细胞的数量，可以直观、量化、动态地了解淋巴