三氧化二砷协同柔红霉素对K562-A02细胞株的作用.doc

　　三氧化二砷协同柔红霉素对K562/A02细胞株的作用 ：王珂，丁家华，吴玮玮，陈宝安，顾炎，袁鹏 【摘要】 　　目的： 研究三氧化二砷(As2O3)及柔红霉素（DNR）联合应用后对人白血病耐药细胞株K562/A02的作用，探讨其应用于临床的可能性。方法： 采用MTT比色法测定单用DNR及DNR与不同浓度As2O3合用时的生长抑制效果，用流式细胞术检测胞内DNR浓度及凋亡。结果： DNR对K562/A02细胞的半数抑制浓度（IC50）为15.4 mg/L，加用0.25，0.5，1.0 μmol/L As2O3时的IC50分别为1.73,0.78，1.42 mg/L。1 mg/L DNR作用于K562/A02 48 h后的凋亡率为(17.4±2.19)%，0.5 μmol/L As2O3作用于K562/A02 48 h后的凋亡率为(53.8±5.6)%，而两药合用后凋亡率为(65.5±6.2)%，但合用后胞内DNR浓度并未增加。结论： 低浓度的As2O3与DNR联合应用对K562/A02细胞的抑制为协同作用，其效应与增加药物的诱导凋亡作用有关，而非通过增加胞内DNR浓度。 【关键词】 药物疗法； 联合； 多药耐药； 三氧化二砷； 柔红霉素 　　［Abstract］Objective: To explore the cytotoxity of bination of arsenic trioxide and daunorubicin on multidrug resistance of cell line K562/A02, and study the feasibility of bination of teasure the groetry. Results： The IC50 of DNR on K562/A02 cells g/L. The IC50 of DNR bined ol/L As2O3 on K562/A02 cells g/L respectively. The apoptosis percentage of treating K562/A02 cells g/L，As2O3 0.5 μmol/L and both for 48 hours ain mechanism may attribute to induction of apoptosis but not increasing the intracellular DNR content. 　　［Key ultidrug resistance; arsenic trioxide; daunorubicin 白血病是常见的血液系统恶性肿瘤，在儿童肿瘤发病中占50%以上。目前，化疗仍为白血病 治疗 的有效手段，尽管不断有新的化疗药物和化疗方案推出，但肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药是化疗失败的主要原因，至今仍为肿瘤治疗的一大难题。目前临床用来克服耐药的手段主要有两个：①尽量选择患者敏感的药物，加大化疗药物剂量；②应用耐药逆转剂联合化疗以克服耐药。前者是应用比较普遍的方法，但疗效不理想，患者往往因出现各种严重的并发症而死亡，因此寻找合适的联合化疗方案受到了越来越多的关注。三氧化二砷（arsenic trioxide，As2O3）是一种与巯基（-SH）有高度亲和力的原浆毒，已成功应用于治疗急性早幼粒细胞白血病, 对其他类型的白血病及多种实体瘤也有效。国内外研究表明，As2O3对一些耐药细胞株仍有诱导凋亡［1-3］及逆转耐药［4］的作用。柔红霉素（daunorubicin，DNR）是一种蒽环类抗肿瘤药，是一种目前广泛运用于血液系统肿瘤和各种实体瘤的化疗药，为细胞周期非特异性药物，对G2期作用尤其显著。我们用MTT法检测了As2O3及DNR对白血病多药耐药细胞株K562/A02的细胞毒性，并通过流式细胞仪检测了凋亡，进一步探讨了As2O3与化疗药物组成联合化疗方案治疗耐药白血病的可能性。 　 　1 材料与方法 　　1.1 细胞系及培养 敏感株K562及其多药耐药（MDR）株K562/A02由 中国 医学 科学 院血液学研究所提供。两种细胞均接种于含10%小牛血清的RPMI1640培养液中，置37℃,5% CO２饱和湿度培养箱中，2～3天传代1次。K562/A02细胞维持增殖的多柔比星终浓度为1 mg/L,实验前无药培养2周。 　　1.2 试剂 噻唑蓝（MTT，Sigma公司），RPMI1640培养液、小牛血清（Gibco公司），柔红霉素（DNR，Farmitalia公司），亚砷酸注射液（As2O3，哈尔滨伊达药业有限公司）。 　　1.3 MTT法检测不同浓度As2O3及DNR合用时的生长抑制作用 取对数生长期的K562及K562/A02细胞以2