人结肠癌中AKT2和PTEN蛋白表达的意义及相关性.doc

　　人结肠癌中AKT2和PTEN蛋白表达的意义及相关性 ：赵红波，张小元，刘迪，刘永杰，张普 【摘要】 　　目的 检测AKT2蛋白在人结肠癌组织中的表达及其与PTEN的相关性。方法 应用免疫组织化学SP法检测30例正常结肠、30例腺瘤和64例结肠癌组织中AKT2和PTEN的表达。结果 从正常组织、腺瘤组织到结肠癌组织，PTEN的阳性表达率呈递减趋势，AKT2呈递增趋势；PTEN在正常结肠组织中的表达明显高于结肠腺瘤和结肠癌组织中的表达，差异有统计学意义(χ2=68.855, Plt;0.05)，而AKT2在结肠腺瘤和结肠癌组织中的表达明显高于正常结肠组织中的表达，差异有统计学意义(χ2=37.574, Plt;0.05)；随结肠癌分化程度降低、淋巴结的转移、Dukes分期的增加,AKT2的阳性表达率升高(Plt;0.05)；PTEN与AKT2的表达呈负相关(r=-0.143，n=64，Plt;0.05)。结论 由于PTEN表达下调或缺失而导致AKT2的异常高表达，AKT2的高表达与结肠癌的发生 发展 有关。 【关键词】 结肠癌；PTEN；AKT2；免疫组织化学法 　　ABSTRACT: Objective To detect the expression of AKT2 in human colon cancer and understand its relationship al colonic tissues, 30 patients a tissues, and 64 patients a tissues by immunohistochemical SP staining method. Results The positive expressive rate of PTEN presented a trend of progressive decrease from normal tissues, adenoma tissues to colon carcinoma tissues, al colon tissues than in colon adenoma tissues and colon cancer tissues (χ2=68.855, Plt;0.05). Hoa tissues and colon cancer tissues al colon tissues (χ2=37.574, Plt;0.01). MAC1/TEP1基因(简称PTEN)是继P53后又一重要的抑癌基因，目前已在许多人类恶性肿瘤和遗传性肿瘤易感综合征中发现存在PTEN基因缺失或突变[12]。PTEN蛋白具有双重特异性磷酸酶活性，可依赖其脂质磷酸酶作用拮抗PI3K/AKT信号通路的活化而发挥抑癌作用[3]。本文采用免疫组织化学(SP)法检测不同结肠病变组织中AKT2和PTEN蛋白的表达，研究二者之间表达的相关性，从而探讨二者在结肠癌发生、发展中的意义。 　 　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　64例结肠癌标本取自2005年6月至2008年6月在甘肃中医学院附属 医院 肛肠科手术切除的患者，男38例、女26例，年龄24～75岁，平均年龄为56岁；30例正常结肠组织、30例腺瘤组织取病理科送检标本；正常结肠组织中男17例、女13例，年龄为36～72岁，平均57.5岁；结肠腺瘤组织中男19例、女11例，年龄为35～76岁，平均63岁。所有标本均经过病 理学 证实，全部病例术前均未接受放疗、化疗；所有标本均经过40g/L甲醛溶液固定，石蜡包埋，4μm连续切片，常规HE染色。 　　1.2 主要试剂 　　PTEN鼠抗人多克隆抗体、免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司，AKT2兔抗人多克隆抗体购自武汉博士德生物有限公司。工作浓度均为1∶100。 　　1.3 免疫组织化学法 　　以PBS代替一抗作阴性对照，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。 　　1.4 结果判定 　　根据染色程度和染色细胞百分比进行评分。染色程度：基本不着色为0级，着色呈淡黄色为1级，着色呈黄色为2级，着色呈棕褐色为3级。染色阳性细胞百分比：着色阳性细胞占计数细胞百分比≤5%为0级，6%～25%为1级，26%～50%为2级，≥51%为3级。将胞质染色程度分级与染色细胞百分比分级相乘，乘积≥4者为表达阳性，0～3为表达阴性。 　　1.5 统计学处理 　　应用SPSS13.0统计软件包进行χ2检验、Pearsons相关检验，以Plt;0.05为差异有统计学意义。 　 　2 结 果 　　2.1 PTEN在正常结肠组织、结肠腺瘤组织及结肠癌组织中的表达 　　PTEN在30例正常结肠组织中有28例阳性表达，表达率为96.7%；在30例结肠腺瘤组织中16例