微生物实验室培养降解尿素与纤维素(用).pptVIP

专题 微生物专题;一、微生物概念及分类 1、概念：是指自然界中那些形态微小、结构简单，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚的生物。 ; ;小资料：乳酸菌每小时产生乳酸能达到自身重量的成千上万倍；大肠杆菌每小时分解的糖是自身重量的两千倍，每20分钟可分裂一次，如保持这一速度，则两天即可超过地球的重量。;二、微生物培养：;概念;概念;1、科学家们用脉胞霉（一种真菌）为材料，进行科学研究，用基本培养基来培养脉胞霉。基本培养基中所含的营养要素一般包括： _______________________________ 2、酵母菌可用于食品工业的废水处理，废水中的淀粉或废糖可与为酵母菌的生长提供________类营养物质。 3、用乳酸菌制酸奶，加入的蔗糖是作为______类营养物质加入到牛奶中的。 4、硝化细菌的碳源、氮源、能源依次为__________________________________。;微生物所需的营养要素;3）培养基的种类;3）培养基的种类;3）培养基的种类;选择培养基;练习：（10全国）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是＿＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于＿＿＿＿。 ;思考：自然界中微生物是混杂的生活在一起的，如何分离出某种微生物（如纯化大肠杆菌）？;无菌技术;1)概念：用温和的物理方法和化学方法杀 死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）;灭菌;灼烧灭菌 干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 高压蒸汽灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min.;无菌技术; 倒平板：待培养基冷却到50OC左右时倒平板。;2、实验操作——大肠杆菌的纯化培养;2）纯化大肠杆菌：;平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的细胞群体，即得到单一菌落。;;秒讹佣李烩稼泽仪京吕涪宰司瑶讯穆汉粕钳须???勋丛畸倘敖尝姨邑底壳爪微生物实验室培养降解尿素与纤维素(用)微生物实验室培养降解尿素与纤维素(用);稀释涂布平板法： 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释梯度菌液分别涂布在固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，进而形成单个菌落。;系列稀释操作;千系薯摇花疤墙靶汾瀑长衔旗款冀汁阂陪戎搞致呆跌潍獭潭娇苏痪绅沥它微生物实验室培养降解尿素与纤维素(用)微生物实验室培养降解尿素与纤维素(用);;平板划线法;三、微生物的分离和计数;思考：如何寻找和分离某种微生物？;启示：分离菌种要人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长，即用选择培养基来分离菌种。;1、活菌计数法（通过统计菌落估算活菌数） 原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。 常用方法：稀释涂布平板法。;注意事项 ①统计的菌落往往比活菌的实际数目低。原因是_____________________________________ ______________________________________。 ②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。(细菌：稀释度104-106；放线菌：稀释度103-105；霉菌：稀释度102-104) ③为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。 ;2、显微镜直接计数法：;1、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数;3）常见的分解尿素的微生物;15.0g;②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？;实验的具体操作 ㈠.土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。 ◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 ㈡.制备培养基： 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。;◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行;㈣.取样涂布;实例2：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落，但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。;小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。;设置对照：; 纤维素分解菌的筛选