细菌介绍与目前通用灭菌方法.pptVIP

消毒与灭菌;1．灭菌：应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方法。 2．消毒：应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物，而对非病原微生物及芽胞，孢子不要求全部杀死。 3．防腐：应用物理或化学方法阻止和抑制微生物的生长繁殖的方法。 4．无菌操作法：防止或杜绝一切细菌进入动物体或其他物体的方法。 5．滤过除菌：液体或气体通过滤过作用除去其中所存在的细菌。一般用0.22微米滤膜，但不能除去病毒，霉形体及L型细菌。 ;第一节 物理因素;一、温度（一）高温对微生物的影响;干热灭菌(dry heat sterilization ) 焚烧灭菌法：常用于废弃物动物尸体等处理。 烧灼灭菌法：是直接火焰灭菌，如接种环灭菌。 烘烤灭菌法；实验室用干燥箱烘。一般是160℃2小时即可达到灭菌目的。;湿热灭菌(mosist heatsterilization) 在同温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好；因为： a比干热更易使菌体蛋白凝固。 b湿热穿透力强； c湿热可以释放大量潜热。 ;湿热灭菌法 高压蒸汽灭菌法 煮沸消毒法 流通蒸汽消毒法 间歇蒸汽灭菌法 巴氏消毒法;高压蒸汽灭菌法 是湿热灭菌中最好的方法， 通常1.05kg/cm2,的压力下面 （此时温度121oＣ）处理15 －30min。要排冷空气，否则 会形成假压力，虽然压力达 到要求，温度却达不到相应 温度，而影响灭菌效果。 ;俩佳拼陛矮什眠骚脑涤创清观茨耕巴韶猖臭床丈淘疆辟幅灶芦慷呢基侈隶细菌介绍与目前通用灭菌方法细菌介绍与目前通用灭菌方法;B、煮沸消毒法 物品在水中煮沸 15min，可杀死所有营养细胞和一部分芽孢。 在水中加入１％的Ｎa2CO3 或２－５％的石碳酸效果更好。此法适合注射器和解剖用具的消毒。 ;C、间歇灭菌法(fractional sterilization） 是用常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法。 主要用于不宜高压灭菌的培养基，不耐热的药物和营养物等 方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持15-30min杀死营养细胞，取出冷却后在37℃恒温培养24小时，使芽孢萌发，再用此法灭菌，反复三次，即可达到灭菌目的。 ;D、巴氏消毒法(pasteurization) 是食品（牛奶）酿造（啤酒）工业中常用的方法。 具体做法是63－65℃处理30min或71～72℃度处理15 s,速冷却至10℃下。 这样即可杀死病原微生物。又不致损坏营养，可保留食品饮料原有风味。 d) 为节省时间，又达到巴氏消毒的效果，现多用高温瞬时灭菌132℃下1-2 s。 ;（二）低温对微生物的影响;二 、干燥;三、渗透压;四、辐射;紫外线：;杀菌机理：;五、滤过除菌法;滤菌器;;六 、其他物理因素;第二节 化学因素;一、常用消毒剂的实用性能见下表;消毒剂类别 ;二、影响消毒剂作用的因素;三、选择适当的消毒剂;第三节 生物因素;一、抗生素与细菌素;（二）细菌素 大肠杆菌产生的细菌素称大肠菌素；葡萄球菌产生的称葡萄球菌素；霍乱弧菌产生的称弧菌素等，每类细菌素又可分为不同的型别；细菌素仅对近缘细菌有作用。;1928年A.Fleming发现青霉素;澳大利亚病理学家霍华德.弗罗里与弗莱明1940提纯出青霉素。 共同获得1945年诺贝尔生理学和医学奖. ;三、 噬菌体;1、组成：主要由蛋白质和核酸组成。 2、基本形态：蝌蚪形、微球形和纤丝形。;以大肠杆菌T4噬菌体为例 头部：廿面体对称结构，由蛋白质衣壳构成，内含一条DNA。 颈部：薄盘状，附颈须。 尾鞘：长95nm, 衣壳粒螺旋对称；可伸缩。 尾髓:中空，DNA可由此进入细胞。 基板: 六角形盘状物，其上有刺突、尾丝。 刺突: 有吸附功能。 尾丝: 有识别吸附功能。;（二）、噬菌体(phage)的繁殖;烈性噬菌体的繁殖过程一般分为五个阶段： 即吸附、侵入、复制、装配和释放。;①吸附：噬菌体和宿主细胞上的特异性吸附部位进行特异性结合，噬菌体以尾丝牢固吸附在受体上后，靠刺突“钉”在细胞表面上。 ②侵入：核酸注入细胞的过程。噬菌体尾部所含酶类物质可使细胞壁产生一些小孔，然后尾鞘收缩，尾髓刺入细胞壁，并将核酸注入细胞内，蛋白质外壳留在细胞外。 ③复制 ：包括核酸的复制和蛋白质合成。噬菌体核酸进入宿主细胞后，会控制宿主细胞的合成系统，然后以噬菌体核酸中的指令合成噬菌体所需的核酸和蛋白质。;④装配： 主要步骤有： DNA分子的缩合——通过衣壳包裹DNA而形成头部——尾丝及尾部的其它部件独立装配完成——头部与尾部相结合——最后装上尾丝，至此，一个个成熟的形