HOXB9和E2F1在结肠癌中的表达及其意义.pdfVIP

2104 重庆医学 2016年 5月第45卷第 15期 · 经验交流 · doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2016．15．023 HOXB9和 E2F1在结肠癌 中的表达及其意义 陈丽梅 ，康颖娜 ，程红平 ，李贵春 ，方 科 (1．江西省鹰潭市人 民医院肿瘤科 335000；2．湖南省娄底市中心医院肿瘤科 417000) [摘要] 目的 探讨同源盒基因9(HOXB9)和 E2F1在结肠癌中的表达及其是否存在相关性。方法 采用免疫组织化学染 色法和westernblot法检测江西省鹰潭市人民医院2Q1l2年 1月至2015年1月65例结肠癌术后病理标本中结肠癌组织和正常结 肠组织中HOXB9和E2F1蛋 白的表达 并进行统计学分析 。结果 HOXB9和 E2F1在 结肠癌组织中均高表达 (-P0．05)， HOXB9在结肠癌中的表达程度与淋已结转移、远处转移和 TNM 分期呈正相关(均P0．05)；而E2F1在结肠癌 中的表达程度与 浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM 分期呈正相关 (均P0．05)；HOXB9和 E2FI在结肠癌组织中的表达呈正相关 (P 0．05)。绪论 HOXB9和E2FI与结肠癌的发生相关，并且在其侵袭转移过程中发挥重要作用。 [关键词] 结直肠肿瘤；基因，同源盒 }HOXB9；E2F1；侵袭与转移 [中图分类号] R735．1 [文献标识码] B [文章编号] 1671—8348(2016)15—2104—03 结肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，近些年其发病率 1．2 主要试剂 免疫组织化学一抗为美 国MolecularTag公 呈上升趋势 。尽管随着新型腹腔镜手术方式的开展和新型靶 司原装进 口；多聚赖氨酸、SP二抗试剂盒及二氨基联苯胺 向药物 的应用 ，结肠癌患者 5年生存率已经有 了很大改善 ，但 (DAB)显色试剂盒购 自镇江厚普生物科技有限公司进 口分装 ； 病死率仍高 。主要死亡原因为肿瘤 的复发和远处转移。结肠 Westernblot一抗为兔抗人 HOXB9多克隆抗体、兔抗人 E2FI 癌转移相关 的基 因有血管 内皮生长因子 (VEGF)、wNT5 和 多克隆抗体、鼠抗人 actin单克隆抗体均购 自SantaCruzBio— KITENIN，但 目前能应用于临床治疗的靶 向药物主要靶点只 technology公司 。 有 Ras基因和 VEGFl】]。 1．3 方法 HOXB9是 HOx家族 中的成员 ，包括 39个基 因，分为 4 1．3．1 免疫组织化学法 采用免疫组织化学染色 SP法检测 个基 因簇 ，分别是 HOXA、B、C和 D，并且分布在 4条不 同染 人结肠癌术后标本 中肿瘤组织和 阴性切缘 中H0xB9和 E2F1 色体上。H0X基因家族在胚胎发育过程中起着重要作用，近 的表达部位及强度 。操作步骤 ：切片 4 m，6O℃烤片过夜；常 些年 的研究表 明 H0x基 因家族在肿瘤 中有表达 ，包括 白血 规脱蜡水化 ，水洗 ；高温、高压修复 5min；滴加一抗 4℃过夜 ； 病 、肺癌 、前列腺癌 、乳腺癌 、结肠癌和卵巢癌[2]。研究表 明， 滴加二抗 ；滴加辣根酶标记链霉卵 白素工作液 37℃，20min； HOXB9是 wNT／T细胞 因子 4(TCF4)信号通路 的靶基 因， DAB显色；苏木素复染；显微镜观察 ；图像分析。 WNT／TCF4信号通路参与了细胞增殖、分化、胚胎分割和四 1．3．2 Westernblot法 取术后新鲜病理标本 ，在肿瘤组织 肢形成等过程口]。HOXB9还可通过上皮细胞 间充 质转化 和阴性结肠切缘进行取材 ，将组织剪碎 ，使用细胞裂解液提取 (EMT)途径促进新生血管形成和远处转移从而促进乳腺癌进 蛋 白。用蛋 白质定量试剂盒 (BCA)法进行蛋 白水平测定 。取 展[4]。研究表明，HOXB9蛋 白在乳腺癌 中表达上调并促进肿 75～100 g蛋 白在 100g