HPLC-ELSD法测定穿山龙中薯蓣皂苷元的含量.pdfVIP

承 德 医 学 院 学 报 VO1．28No．2 201l Bt菌株中杀虫晶体蛋白的表达与相应基因的存在 2l2 有着一定的对应关系，一般cryl型基因表达l30kD蛋白， I10 口 cry2型基因达60kDa蛋白。但也存在个别现象，Ql菌株 e6 虽表达l30kD、60kD的蛋 白，从基因鉴定和蛋白分析结 40 果可见，Q1菌株只鉴定出cryl型基因并不含有cry2型 基 因；cry7的同源区段已被克隆，可确认为是新型cry7 图3Q1菌株晶体蛋I~SDS分析图谱 基因，全长基因在进一步克隆当中 J。 2．3 杀虫晶体蛋白透射 电镜分析 见图4。透射电镜结 透射电镜可以清晰显现晶体形状，是一种研究晶体 果显示野生菌Q1的ICPs蛋 白晶体形状呈菱形(E)或长 形状的可靠方法。研究发现，野生菌Ql的ICPs蛋白晶体 菱形(B)，D为菱形棱角被消化的现象。 形状呈现长菱形或菱形 ；且有些照片显示不规则的菱形 晶体，可能是由于晶体被蛋白酶少量降解，棱角被钝化 和切片位置不同造成。 【参考文献】 1【】 宋福平，张杰，黄大畸，等．苏云金芽孢杆菌cryl基 因 缝PCR-RFLP鉴定体系的建立[J】．中国农业科学，1998， 31(3)：13-18． 图4Q1菌株晶体蛋白形态 2【】 李长友．我国不同森林立地带Bt分离株杀虫晶体蛋白及 2．4 cry7同源 区段 的克隆 野生菌Qlcry7同源 区 基因分析J【】．林业科学，2002，38(3)：102-105． 段840bp的PCR高保真产物连接T载体后，转入E．coli 3【】 Ch fA，Rez 】iW addadiN，eta1．Characterizationmadpartia~ ll0，克隆并测序。阳性克隆质粒鉴定图谱见图5，显示 purificationofentomocin 110，anewlyidentifiedbacterioein fromBacillusthuringiensissubsp．EntomocidusHD110[J]． 840bp的目的片断已被成功连接、克隆。与相关模式基因 MicrobiolRe