野生天麻dna导入马铃薯实现-广西植物.pdf

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野生天麻dna导入马铃薯实现-广西植物

维普资讯 广 西 植 物 Guihaia 25(4):353— 355 2005年 7月 野生天麻DNA导入马铃薯实现 遗传转化的研究 周鹤峰 ,邵 敏2,葛正龙2 (1.遵义医学院珠海校区生物 工程教研室 .广东珠海 519041;2.遵义医学院生物化学教研室 ,贵州遵义 563003) 摘 要:采用浸苗法将野生天麻总 DNA导入马铃薯试管苗,对筛选得到的转化植株进行蛋白及药用成份 的 分析。结果显示 :(1)在 200株转化的马铃薯 中有 21株 的紫外扫描图谱与正常对照组有显著差异 ,且在 220nm有明显吸收峰。(2)5株经 PCR扩增出野生天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因。(3)转基因马铃薯与正常 马铃薯的蛋 白表达有明显差异 ,并且在转基因马铃薯 中有一条与野生天麻抗真菌蛋白(GAFP)相同的条带。 而正常马铃薯中无此条带。(4)通过薄层层析法检测出3株转基因马铃薯表达野生天麻的有效药用成份天麻 素。说明采用浸苗法进行外源总DNA导入是可行的。 关键词:野生天麻 ;浸苗法 ;天麻素;转基因 中图分类号:Q943.2 文献标识码:A 文章编号:1000-3142(2005)04-0353-03 A genetictransformation studyofintroducing wildGastrodiaelata DNA intopotato ZHOU He—feng ,SHAO M in ,GE Zheng—long (1.DepartmentofB 0Pn耳nPP—n ,ZhuhaiCampus,ZunyiMedicalCollege,Zhuhai519041,China; 2.DepartmentofBiochemistry。ZunyiMedicalCollege,Zunyi563003.China) Abstract:Afterthetuberhadgrownup,thesolutionofgastrodinwasextractedfrom thepotatoeswhichwere transformedbywildGastrodiaelataDNA.SDSwasusedtOanalyzeGAFPgene.TLCwasusedtOan- alyzethegastrodinoftransformedpotatoes.Results:(1)21transformedplantshadobviousobsorptionpeakat 220nm in200transformedpotatoes.(2)ThefragmentofwildGastrodiaelata GAFPgenewasfoundbyPCR from 5transformedplants. (3)Theproteinexpressionsintransgenicpotatoeswereobviouslydifferentfrom normalpotatoes;A bandwasdetected in transgenicpotato andwildGastrodiaelata,butwasn tdetected in normalpotatoes.(4)W edetectedtheexpressionofthegastrodinbyTLCfrom 3transformedplants.Itisfea- sibletOusethesoakingseedlingmethodtOintroduceexogenousDNA intoplants. Keywords:wildGastrodiaelata;soakingplantletsmethod;gastrodin 野生天麻 (Gastrodiaelata,BI)属兰科 ,是名贵 法”、“浸泡法”等方法将外源 DNA导人植物已成为 传统中

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