干旱胁迫对小麦的生理生化化指标的影响.docVIP

干旱胁迫对小麦的生理生化化指标的影响 摘 要：研究干旱（干旱5天）胁迫对小麦生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽(GSH)、可溶性糖(WSS)的含量的影响。结果表明干旱对这些生理生化指标的含量都有影响，经干旱胁迫后Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS的含量显著升高，且Pro和PPO的含量升高的幅度极显著。只有POD的含量经干旱胁迫后呈下降趋势。从总体上看，经胁迫后的小麦抗逆性强于正常生长的小麦。 关键词： 小麦、干旱、Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS、POD 植物体生存在自然环境中，由于自然环境是个变数，其水热条件随时都变化，对植物多少会产生一些影响。凡是对植物产生伤害的环境都被称为逆境，也称胁迫。干旱也属于逆境，水分在植物的生命活动中占主导地位，大多数植物遭受干旱逆境后各个生理过程都会受到不同程度的影响。植物的生长主要是叶的生长，但Hsico等(1987年)指出,叶的扩展生长对缺水最为敏感，轻微的胁迫就会使其受到明显限制。扩展生长不论是细胞分裂分化或体积扩大,都同时依赖于水的吸收、溶质的积累和胞壁的松驰。任何能直接或间接影响三者之一的因素均能影响生长。当植物受到逆境胁迫时，会采取一定的措施来抵抗不良环境，比如生理生化指标Pro、MDA、H2O2、PPO、GSH、WSS、POD等发生变化。 小麦是世界上仅次于玉米的第二大粮食作物，也是我国北方主要的粮食作物之一。世界上约有70％的小麦播种面积分布在干 旱、半干旱农业区。其在生长过程中，经常会受到干旱的影响，在世界范围内，由于水分所造成的减产，可能要超过其他因素所导致的产量损失 总和。，干旱胁迫下小麦的生理生化特性差异被认为是小麦抗旱性差异的内在原因。本次实验是研究吸胀12小时萌发一周后，干旱处理5天的小麦其生理生化指标含量的变化，这可以为抗旱研究作出一点贡献。 1 材料和方法 1.1 供应材料。 小麦种子；主要试剂：0.1% HgCl2 ，TTC，3%磺基水杨酸（SSA），冰乙酸，茚三酮，PBS(pH=7.8) ，0.6%TBA（用0.6% TCA配制）， PBS (pH=6.8，内含1mMHA)，0.1%Ti(SO4)2 [用20%(v/v) H2SO4配制] ，PBS, （pH=5.8,内含0.１mmol/ LEDTA, 1%PVP）， POD反应混合液（10　mmol/L愈创木酚，5 mmol/L H2O2,用PBS溶解），PPO反应混合液（ 20 mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）5%三氯乙酸，PBS (pH=7.7) ，4 mM DTNB (用0.1M pH=6.8PBS现配)。主要仪器：分光光度仪，离心机，试管，微量加样器，研钵等。 1.2材料处理。 经发芽率测定，小麦的发芽率是100%。 小麦→ 用0.1% HgCl2消毒10 min后 → 用蒸馏水漂洗干净 → 用蒸馏水于26℃下吸涨12 h → 播于垫有6层湿润滤纸的带盖白磁盘（24cm×16cm）中 → 于26℃下暗萌发60 h →计算发芽率 → 选取长势一致的玉米幼苗做干旱、高温、盐渍或低温下处理（去除较矮或较高的玉米幼苗）。 1.3 实验方法。 1.31 Pro的提取步骤和结果。分别取0.1 g实验组（为干旱处理5天）和对照组（不做干旱处理）的胚芽鞘置于研钵中，加入3 mL 3%磺基水杨酸（SSA）和少许石英砂充分研磨，再用2 mL 3% SSA洗研钵，置于离心机中，在5000 rpm下离心10 min ，取上清液，定容至5 mL。测定：取上清液各2 mL ，分别加入2 mL冰乙酸和2 mL茚三酮试剂再煮沸15 min，冷却后，5000 rpm离心10 min ，分别测定A520 。 表一 Pro正常组和实验组A520的 Pro content 由图表可知，正常组的Pro汉两为9.95(?mol.g-1FW)，而干旱胁迫组的Pro含量为97.69(?mol.g-1FW)，后者是前者的9.8倍。由此可见正常情况下脯氨酸的含量较小，一旦受到干旱胁迫，其含量就会大幅度增加。 1.32 丙二醛（MDA）提取。分别取0.1 g实验组和对照组（与1.32做相同处理）置于研钵中，加入3 mL 50mM PBS (pH=7.8)和少许石英砂充分研磨，再用2 mL PBS洗研钵，置与离心机中，在5000 rpm下离心10 min ，取上清液，定容至5 mL。测定：分别取上清液各2 mL ，加入0.6%TBA（用0.6% TCA配制） 2 mL，煮沸12 min，冷却后，5000 rpm离心10 min ，分别测定OD450和OD532。 正常（对照组） 干旱胁迫（实验组）