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《分子生物学》复习参考资料 一、名词解释 1．cDNA 与cccDNA：cDNA 是由mRNA 通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA 是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP 与CRP 结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ） 4．回文序列：DNA 片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA 或称反义RNA，与mRNA 序列互补，可抑制mRNA 的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA 的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N 端有15~36 个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp 与pppGpp 的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10 区的TATA、-35 区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA 探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。 13．SD 序列：是核糖体与mRNA 结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA 载体，保留噬菌体两端的COS 区，与质粒连接构成。 16．蓝-白斑筛选：含LacZ 基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA 插入后，LacZ 基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA 中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18．Klenow 酶：DNA 聚合酶I 大片段，只是从DNA 聚合酶I 全酶中去除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG 的尾巴，然后分别用多聚dC 和已知的序列作为引物进行PCR 扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填 空 1．1．DNA 的物理图谱是DNA 分子的（限制性内切酶酶解 ）片段的排列顺序。 2．2．RNA 酶的剪切分为（自体催化 ）、（异体催化 ）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。 4．蛋白质的跨膜需要（ 信号肽 ）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件 ）和（上游启动子元件 ）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学 ）、（基因表达与调控 ）、（ DNA 重组技术 ）三部分。 7．证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠 ）、（ T2 噬菌体感染大肠杆菌 ）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA 改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA 与mRNA 之间的差别主要有两点：（ hnRNA 在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、（ mRNA 的5′末端被加上一个m7pGppp 帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA 的利用来说是一种经济的方法 ）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭 ）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核 ）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长 ）；另一方面（它又是细胞壁的成分 ）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP 的启动子S2 进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CR