主题7核矩阵的结构和组成.ppt

专题七：核基质的结构与组成;一、细 胞 核 简 介;图7-1：真核生物细胞核结构示意图 ;;;;（一）核被膜：;图7-2：核被膜结构示意图;核被膜在细胞有丝分裂中有规律地解体与重建，新核膜来自旧核膜。核被膜的去组装是非随机的，具有区域特异性（domain-specific）。以非洲爪蟾的卵提取物为基础的非细胞核装配体系提供了实验模型。 核被膜的解体与重建的动态变化受细胞周期调控因子的调节，调节作用可能与核纤层蛋白、核孔复合体蛋白的磷酸化与去磷酸化修饰有关。 ;1、核膜 （nuclear membrane）;2、核孔复合体（nuclear pore complex，NPC） ;从横向上看，核孔复合体由周边向核孔中心依次可分为环、辐、栓三种结构亚单位；;;核孔复合体主要由蛋白质构成，其总相对分子质量约为1-5×106，推测可能含有100余种不同的多肽，共1000多个蛋白质分子。 如：gp210是一种结构性跨膜蛋白，介导核孔复合体与核被膜的连接，将核孔复合体锚定在“孔膜区”，从而为核孔复合体装配提供一个起始位点； p62是一种功能性的核孔复合体蛋白，具有两个功能结构域，可能在核孔复合体功能活动中直接参与核质交换。;;3、核纤层（Nuclear lamina） ;图7-4：核纤层结构示意图;一般认为核纤层为核膜与染色质提供了结构支架，并介导核膜及染色质之间的相互作用。 如：①维持核孔的位置和在有丝分裂间期对细胞核膜起支撑作用以维持核被膜的形状； ②为间期染色质提供锚定位点，为分裂期染色体提供构建附着的位点，介导核膜与染色质之间的相互作用； ③与在分裂期调控核膜的解离和重新装配有关。;;;;（二）染色质;图7-5：核小体结构模型 ;1、染色质组成;2、染色质的存在形式 ;;;3、染色体的结构;（三）核仁（necleolus）;1、核仁的化学组成与形态结构;核仁在电子显微镜下可辨认出有3个特征性的区域（图7-7） ：;图7-7：核仁结构示意图 ;2、核仁相随染色质(nucleolar associated chromatin)：;3、rRNA基因转录的形态及组织特征 ;4、核糖体亚单位的组装 ;（四）核基质（nuclear matrix） ;二、核 基 质 概 述;长期以来，对细胞核的研究主要集中于染色质、核仁和核膜，尤其是注重对DNA、RNA、组蛋白和核酸酶的研究。 核骨架曾长期被人们所忽视，直到70年代中期，Berezney和Coffey等(1974)才首次将核骨架(nuclear matrix)作为细胞核内独立的结构体系进行研究，用非离子去垢剂、核酸酶与高盐缓冲液对大鼠肝细胞进行处理，当核膜、染色质与核仁被抽提后，发现核内仍存留有一个以纤维蛋白成分为主的网架结构。 1991年，Coffey提出核骨架模型（图7-8）。 ;图7-8：核基质结构示意图 ;;核基质的功能不仅仅依靠核基质本身的蛋白质完成，更重要的是要通过多种核基质结合蛋白的共同参与，完成核基质复杂多样的生物学功能。 长期以来人们对此进行了大量的研究并证实一些与DNA、RNA代谢合成密切相关的酶类，细胞信号识别和细胞周期的调控因子以及病毒特异的调控蛋白等能够紧密结合在核骨架结构上。 ;核基质具有广泛生物学效应;（一）核基质的形态结构;;图7-9：核基质电镜图 ;;(二)核基质的成分 ;;;;;;;;;;(三)核基质结合蛋白 ;表7-1：核基质结合蛋白;(四)核基质的功能;;;;1、核骨架与DNA复制 ;核基质可以作为DNA复制的空间支架，拓扑异构酶Ⅱ使DNA的两条链同时断裂和再连接，当它引入超螺旋时需要由ATP供给能量。分布在染色质骨架蛋白和核基质部分与复制有关。 以往研究体外DNA复制时，大多将细胞中不溶性物质去除，在可溶性上清中研究DNA复制，似乎DNA复制是在可溶性反应系统中完成的。;;图7-11：染色体构建的支架结构模型 ;;;;;2、核骨架与基因表达 ;;图7-12：DNA复制模型;;3、核骨架与病毒复制 ;4、核骨架与染色体构建 ;;;;5、核基质与细胞凋亡;;;;（五）核基质附着区(MARs) ;;1、 MARs 的结构特征 ;;2、MARs与核基质的结合特征;;已经纯化和鉴定的MARs结合蛋白共10余种(表7-3)。;表7-2：已经纯化和鉴定的MARs;表7-2：已经纯化和鉴定的MARs（续）;;表7-3 MAR结合蛋白及其识别位点的主要特征 ;3、MARs的功能 ;3.1 边界因子作用：;;3.2 染色质调节作用;3.3 DNA复制起始子的组分：;3.4 染色体结构组成作用：;4、MARs对转基因表达的调控作用 ;;;5、MARs在转基因中的应用 ;;;;;5.2 MARs降低转基因表达水平差异;;;;;;（六）核仁基质;;1、核仁骨架结构、成分与功