植物组培简答题.docVIP

1、从外植体到小植株有哪些培养途径？ 离体器官的分化有三种比较典型的分化途径：一是由分生组织直接分生芽；二是由分生组织形成愈伤组织，经过分化实现细胞的全能性；三是游离细胞或原生质体形成胚状体(embryoid)，由胚状体直接重建完整植株，或制成人工种子后再重建植株。 愈伤组织再分化时，可经过两条途径，一是由愈伤组织的部分细胞先分化产生芽（或根），再在另一种培养基上产生根（或芽），形成一个完整的植株，因为芽和根都是植物体的器官，所以这一过程叫器官发生途径。二是在愈伤组织中产生出一些与种子中的胚相似的结构，即同时形成一个有苗端和根端的两极性结构，然后再在另一种培养基上同时发展成带根苗，由于这一过程与种子中胚的形成和种子萌发时形成幼苗的过程相似，所以叫做胚状体发生或无性胚胎发生。 2、试述目前植物组织培养的应用。 （1）植物离体快繁无病毒苗木培育 培育新品种或创制新物种 次生代谢物生产植物种质资源的离体保存 人工种子 无菌操作室无菌操作室除定期熏蒸灭菌外，还要经常通过紫外灯灭菌。无菌操作在实验之前30m将超净工作台的紫外灯打开，进行灭菌。工作人员要避免紫外线照射。做实验时将紫外灯酒精浓度为70％70％酒精消毒。90％酒精浸泡，之后放在酒精灯上火烧灭菌，再放在灭菌支架上冷却后使用。MS培养基是1962年Murashige和Skoog为培养烟草材料而设计的。特点是无机盐的浓度高，有加速愈伤组织生长的作用，能满足植物组织对矿质营养的要求。铵盐和硝酸盐含量高，比例也比较适合，也不需要添加更多的有机附加物，这是目前应用最广泛的一种培养基。但它不适合生长缓慢、对无机盐浓度要求较低的植物，尤其不适合过高易发生毒害的植物。与MS培养基较为接近的还有LS培养基(Linsmaier和Skoog，1965)及ER培养基(Ersson，1965)MS培养基相比，于1943年设计，1963年作了改良的White培养基则是一个无机盐浓度较低的培养基。它的使用也很广泛，同时它还非常适合于生根培养和胚胎培养。3.B5培养基是1968年由Gamborg等设计的。它的主要特点是含有较低的铵盐，该营养成分可能对不少培养物的生长有抑制作用，对有些植物如双子叶植物（如豆科植物）特别是木本植物，却更适合生长。4.N6培养基是1974年由我国的朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的，其KN03和(NH4)2S04含量高且不含钼。目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花粉和花药培养和组织培养。 5、试述培养基选择的方法。 培养基的选择是植物组织培养中较为关键的环节。选择合适的培养基是植物组织培养成功的基础。选择合适的培养基主要从以下两个方面考虑：一是基本培养基；二是各种激素的浓度及相对比例。 可根据实验目的和实验材料确定一种合适的基本培养基。 组织培养中对培养物影响最大的是外源激素，在基本培养基确定之后，实验中要大量进行的工作是用不同种类的激素进行浓度和各种激素间相互比例的配合试验。可用“广谱实验法”确定各种激素的有无及浓度。 6、简述植物细胞全能性、细胞分化、脱分化与再分化的概念。 植物细胞全能性（totipotency）是植物组织培养的理论基础。它是指一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的全部遗传信息，在适当的条件下，这些信息可以表达，再生成一个完整植株。 细胞分化(differentiation)是指生物在个体发育过程中细胞由一般变为特殊的现象，即普通形态结构的细胞，向着不同形态结构的方向发展，从而在机能上也各不相同。 脱分化：由失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成形成一种高度液泡化的呈无定形态的薄壁细胞即愈伤组织的现象（或过程）称为“脱分化”(dedifferentiation)。 再分化：由无分化的愈伤组织的细胞再转变成为具有一定结构，执行一定生理功能的细胞团和组织，进而构成一个完整的植物体或植物器官的现象（或过程），叫做“再分化”(redifferentiation)。 2、再分化有哪几种方式？它们的特点是什么？ （1） 细胞水平的再分化组织水平的再分化器官水平的再分化 植株再生根和茎(包括其变态器官)或芽器官的发生可使植株重建。在离体培养中通 再分化有两种途径，一种是器官发生 (organogenesis)途径，一种是(embryogenesis) 途径。者具体包括：①在大多数情况下，再分化过程是在愈伤组织细胞中诱导期分裂期期1）高度的胚性或再分化能力，以便从这些愈伤组织得到再生植株。 容易散碎，以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮系，并且在需要时能从中旺盛的自我增殖能力，以便用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无 （4）经过长期继代保存而不丧失胚性，以便有可能对它们进行各种遗传操作。1）选择适当的基因型