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项目编号： 甘肃中医学院药学系毕业论文 课题名称 红芪多糖抗肝纤维化的药效学研究 专业年级 药物制剂2007级 课题组人员 郭倩 指导教师 韩涛 甘肃中医学院药学系 二0一一年编制 红芪多糖抗肝纤维化的药效学研究 药物制剂2007 郭倩 指导老师 韩涛 摘 要：目的：研究红芪多糖抗肝纤维化的作用，证明红芪多糖在抗肝纤维化方面的使用价值。方法：雌雄各半Wistar大鼠84只，随机分成七组，每组十二只，分别为空白对照组，模型组，黄芪多糖对照组，红芪水煎液对照组和红芪多糖低剂量组、中剂量组、高剂量组。实验采用二甲基亚硝胺对大鼠进行急性小剂量间歇性腹腔注射3周，制作大鼠实验性肝纤维化模型。造模成功后，各实验组以不同实验药物灌胃给药，4周后对各组肝纤维化大鼠肝组织中透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层粘连蛋白（LN）、III型前胶原（PCIII）、羟脯氨酸（Hyp）五项指标进行测定，以反映肝细胞损伤及肝纤维化的程度。结果：红芪多糖组治疗后大鼠肝组织HA、Ⅳ-C、LN、PCIII、HYP水平明显低于模型组，差异有显著性；红芪多糖高、中剂量组能显著降低肝纤维化大鼠肝组织HA、Ⅳ-C、LN、PCIII、HYP的水平，能明显改善实验大鼠肝纤维化程度。结论:红芪多糖对实验性肝纤维化具有一定的治疗作用。 关键词：红芪多糖（HPS）；二甲基亚硝胺(DMN)；肝纤维化；羟脯氨酸（Hyp）；  药用黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.var.mongholicus (Bge.) Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.的干燥根。黄芪是常用的补益类中药, 始载于神农本草，具有补气固表,利尿消肿,排毒,敛疮生肌之功。现代研究表明,黄芪对肝细胞的免疫损伤有保护作用,可促进肝细胞再生,同时有抗肝纤维化作用,可使已形成的肝纤维化得到较好的改善和逆转。红芪与黄芪功效相近，红芪多糖为其主要成分，历史上常作为黄芪的代用品。本实验研究了红芪多糖对大鼠肝纤维化的药理作用，探究红芪多糖对肝纤维化的治疗作用。 1. 实验材料 1.1 药品：红芪多糖、黄芪多糖、红芪水煎液（每ml相当于生药材0.27g）（甘肃中医学院药化实验室）；二甲基亚硝胺（天津市化学试剂研究所）；大鼠ELISA试剂盒(RD)；生理盐水（四川科伦药业股份有限公司，1）。 1.2 仪器：多功能时间分辨荧光免疫分析系统(芬兰 wallac VICTOR2 1420)；离心机（上海手术器械厂，80-1型）。 1.3 动物：Wistar大鼠，雌雄兼用，体重为200±20g，由甘肃中医学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（甘）2004-0006。 2.方法 2.1 实验分组：取Wistar大鼠84只，雌雄各半，随机分成七组，每组十二只，分别标记。分别为空白对照组，模型组，黄芪多糖对照组，红芪水煎液对照组，红芪多糖低剂量组、中剂量组、高剂量组。 2.2 模型建造：按文献方法，用生理盐水将二甲基亚硝胺稀释至浓度为1%，除空白对照组外，对其余大鼠腹腔注射DMN稀释液1ml/kg体重，每天1次，连续3天，空白对照组腹腔注射等剂量生理盐水，共3周。 2.3 给药：造模成功后，黄芪对照组灌胃给药黄芪多糖300mg/kg体重；用红芪多糖对低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃给药150mg/kg体重、300mg/kg体重、600mg/kg体重；红芪水煎液对照组灌胃给药2.7g/kg体重；模型组、空白对照组用生理盐水10ml/kg体重进行灌胃给药，每天1次，共4周。2.4 标本采集：最后一次给药后，将肝纤维化大鼠禁食12h后颈椎脱臼处死,剖腹取肝脏观察大体外观后,用冷生理盐水洗涤，滤纸吸干水分，准确称取肝脏0.5g置于组织匀浆器中，加9倍量生理盐水制备成10%的肝组织匀浆，3000r/min离心10min，-20℃保存待测。 2.5 指标检测：采用酶联免疫法用ELISA试剂盒对透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层粘连蛋白（LN）、III型前胶原（PCIII）、羟脯氨酸（Hyp）进行测定。 3.数据处理： 各组大鼠肝纤维化指标测定数据均以±s表示，采用SPSS14.0统计软件处理，用两个独立样本的t检验对数据进行统计分析，显著性标准为P0.05。 4.结果： 4.1 DMN染毒期