细菌特殊染色技术.pptVIP

细菌的特殊染色技术 一、目的要求 学习并掌握芽胞染色法原理和方法，并了解芽胞的形态特征； 学习并掌握荚膜染色法原理和方法，并了解荚膜的形态特征； 巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。 二、基本原理 用着色力强的染色剂孔雀绿或石炭酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体更易于区分。 二、基本原理 荚膜是包裹在某些细菌细胞外的一层黏液状或胶状物质，含水量很高，其他成分主要为多糖、多肽或糖蛋白等。荚膜不易着色且容易被水洗去，因此常用负染法进行染色，而荚膜不着色，在深色背景下呈现发亮区域。 由于荚膜含水量高，制片时通常不用热固定，以免变形影响观察。 三、器材 菌种 枯草芽胞杆菌、褐球固氮菌 2d营养琼脂斜面培养物。 溶液和试剂 5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液、绘图墨水（滤纸过滤后使用）等。 仪器和其他用品 酒精灯、载玻片、盖玻片、显微镜、双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，接种环，小试管、烧杯、试管架，镊子，载玻片夹子，载玻片支架，滤纸，滴管和无菌生理盐水等。 四、操作步骤 1、芽胞染色 制片 按常规方法涂片、干燥及固定；（回忆涂片的关键环节？） 加热