海洋植物抑菌活性初步探究.docVIP

海洋植物抑菌活性初步探究摘要：采用生长速率法对海带和裙带菜的抗真菌活性进行了筛选。结果表明：海带三种溶剂提取物对小麦赤霉病菌、黄瓜枯萎病菌和苹果腐烂病菌均有一定的抑制作用，对小麦赤霉病菌的抑菌活性最好，其中乙醇提取物的抑菌率达到了100%，乙酸乙酯和石油醚提取物的抑菌率也在50%左右；乙醇和乙酸乙酯提取物对黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别是67.5%，42.11%。除乙醇提取物外，其余两种溶剂提取物对青霉病菌均有一定的抑菌效果。但三种溶剂提取物对番茄绵腐病菌均无抑菌效果。裙带菜乙醇提取物对除黄瓜枯萎病菌外的四种病菌均有抑制效果。且裙带菜乙醇提取物的抑菌效果要高于海带乙醇提取物的抑菌效果。同时还测定了海带乙醇提取物在五种梯度浓度下对苹果腐烂病菌和小麦赤霉病菌的抑菌活性，结果表明对苹果腐烂病菌和小麦赤霉病菌的EC50分别为0.67g干物质/ml和0.03g干物质/ml。 关键词：海带；裙带菜；真菌；抑菌活性；EC50 中图分类号：TQ450 文献标识码：A 文章编号：1003-2738（2012）06-0323-01 由于海藻是海洋生物群落中地位较低的组成者。海藻为了对付海洋食草动物的大量吞食来维护自身的生存繁衍，大多能产生一些很有特色的代谢物质。欧美及日本的学者曾研究了多种海藻的抗菌活性，发现多卤、多硫化合物、萜类及结构独特的二萜醇是主要的抗菌成分[1]。 现以海带和裙带菜作为实验材料，通过用不同溶剂对海藻的活性物质进行提取并测定其对苹果腐烂菌等真菌的抑菌活性，以验证海洋植物内抑菌活性物质的存在，初步明确海藻活性提取物对何种真菌具有较好的抑菌活性，为植物源农药的开发和综合利用做初步研究。 一、材料与方法 1．实验材料和实验方法 （1）供试海藻。供试海藻为产自青岛的海带和裙带菜，自然晾干后粉碎备用。 （2）海带及裙带菜粗提物抑菌活性测定。采取连续稀释法纯化，按慕立义[4]方法计算抑菌率。抑菌率计算公式如下： 抑菌率(%)=[1-（处理生长直径-菌饼直径）/（对照生长直径-菌饼直径）]×100% （3）用以上方法测定不同浓度海带提取物对真菌的抑菌率。将数据进行浓度——对数和抑菌率——几率值的转换计算出毒力回归方程，根据回归方程计算出有效中浓度EC50。 二、结果与分析 1.三种溶剂的提取率。 海带粉末分别用乙醇、乙酸乙酯和石油醚平行提取，结果如下：三种溶剂的极性为乙醇乙酸乙酯石油醚，乙醇的提取率最高，石油醚的提取率最低，这说明海带中可能含有较多的极性物质。 2提取物抑菌活性分析。 各溶剂提取物对苹果腐烂病菌、青霉病菌、黄瓜枯萎病菌、番茄绵腐病菌和小麦赤霉病菌的毒力测定结果如下： 海带三种溶剂提取物对小麦赤霉病菌、黄瓜枯萎病菌和苹果腐烂病菌均有一定的抑制作用，其中对小麦赤霉病菌的抑菌活性最好，乙醇提取物的抑菌率达到了100%，乙酸乙酯和石油醚提取物的抑菌率也在50%左右；乙醇和乙酸乙酯提取物对黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别是67.5%,42.11%。三种溶剂对苹果腐烂病菌的抑菌率也分别为33.39%,31.61%和23%。除乙醇提取物外，其余两种提取物对青霉病菌均有一定的抑制作用。但三种溶剂提取物对番茄绵腐病菌均无抑菌效果。 3.裙带菜乙醇提取物的抑菌活性。 （1）乙醇提取物的提取率。 对裙带菜（50g）进行乙醇回流提取，得到提取物为墨绿色浸膏，共8.403g，提取率为16.806%。高于海带乙醇提取物的提取率。 （2）裙带菜乙醇提取物的抑菌活性测定。 裙带菜乙醇提取物对苹果腐烂病菌、青霉病菌、黄瓜枯萎病菌、番茄绵腐病菌和小麦赤霉病菌的毒力测定结果如下： 裙带菜乙醇提取物对除黄瓜枯萎病菌外的四种病菌均有抑菌效果。其中对小麦赤霉病菌的抑菌效果最好，达到了100%，对苹果腐烂病菌的也达到了38.39%，对番茄绵腐病菌和青霉病菌也有一定的抑菌效果。裙带菜乙醇提取物的抑菌效果要高于海带乙醇提取物的抑菌效果。 4.不同浓度海带乙醇提取物的抑菌活性。 不同浓度海带乙醇提取物对苹果腐烂病菌和小麦赤霉病菌的抑制作用如下： 乙醇提取物对两种植物病原菌均有抑制作用，其中对小麦赤霉病菌抑菌效果要好于苹果腐烂病菌。在浓度为0.4 g干物质/ml时对小麦赤霉病菌的抑菌率达到99.82%，对苹果腐烂病菌的抑菌率达到50%。在浓度为0.025 g干物质/ml的浓度下，对小麦赤霉病菌仍有较好抑制效果，抑菌率达到58.92%。 乙醇提取物对苹果腐烂病菌、小麦赤霉病菌的毒力方程分别为Y=5.14+0.81X和Y=8.05+2.01X，EC50分别为0.67g干物质/ml和0.03g干物质/ml。 三、讨论 1.海带粗提物的制备及相关特性： 本实验的目的是从海带和裙带菜中