氯丙醇(DCP、MCPDGC-MS同时测定-2004,2.21-杂志用-改1-缩.docVIP

稳定性同位素稀释技术结合GC-MS测定酱油多组分氯丙醇的研究 傅武胜1，2 吴永宁1 赵云峰1 张磊1 唐昌东2 （1中国疾病预防控制中心营养与食品安全所，北京,100050,） (2福建省疾病预防控制中心，福州，350001) 摘要 本文首次建立了用两种同位素内标同时测定酱油中4种氯丙醇的GC－MS方法， 样品中加入稳定性氘代同位素内标，采用硅藻土固相层析净化酱油样品，经七氟丁酰衍生化后得到分析物，衍生物在DB-5毛细管柱中经程序升温得到良好的分离，用选择离子存储（SIS）定量。进样量为20～～～～～～～xtrelutTM 20硅藻土填料（德国Merck公司）、七氟丁酰基咪唑（HFBI，美国Pierce公司）、3-氯-1,2-丙二醇（3-MCPD）（25ml,Aldrich Chemicals InC.）、1,3-二氯-2-丙醇(1,3-DCP,Fluka)和2,3-二氯-1-丙醇(2,3-DCP,97.0%,Fluka)、稳定性同位素d5-3-氯-1,2-丙二醇标准品（98%,1ml,Isotec InC.）、d5-1,3-二氯-2-丙醇标准品(d5-1,3-DCP，98%,5g,Cambridge Isotope LaboratoriesInC.)、超纯水、工业氮气（纯度99.5%,用于溶液的浓缩））mol/L） 氯丙醇混标溶液：用乙酸乙酯分别配制3-MCPD、1，3-DCP、2,3-DCP标准储备液（1000mg/L），用农残级正己烷配制中间溶液（100 mg/L），最后用正己烷配成浓度为2.00mg/L的混合标准使用液。 氯丙醇内标混合液：用乙酸乙酯分别配制d5-3-MCPD 、d5-1,3-DCP的储备液（1000 mg/L），最后用农残级正己烷配成浓度为10 mg/L的混合内标使用液。 2 仪器与装置 CP-3800气相色谱仪，Saturn 2000质谱仪（Varian公司）、CP-8200自动进样器、玻璃层析柱（40cm×2cm i.d.）、旋转蒸发仪、111型N2-浓缩器、Pwsio―002型数显保温培养箱、G-560E型漩涡振荡器、AE 160型分析天平（准确至0.1mg，瑞士Mettler公司，用于配制标准溶液）、AR2130/c型Advanturer电子精密天平（准确至1mg，上海奥豪斯公司，用于称取样品）.00g～8.00g，置100ml烧杯中，加入d5-3-MCPD、d5-1,3-DCP内标混合溶液（10 mg/L）20?l，加饱和氯化钠溶液2g，超声10分钟。 汤料或固体与半固体植物水解蛋白：称取样品2.00~4.00g，置100ml烧杯中，加内标混合液（10 mg/L）100?l，加饱和氯化钠溶液4g，超声15分钟，减压抽虑，用饱和氯化钠溶液多次洗涤残余物至滤液为10.0ml（最终取1/5的溶液用于衍生）。试剂空白用饱和氯化钠溶液（5 mol/L） 10ml，其余同样品操作。 3.2 样品提取 将净化中所用正己烷：乙醚（9+1）改为纯正己烷，用量为40ml，其余同GB/T5009.191-2004（浓缩以及吹氮气时不能蒸干，否则双氯取代氯丙醇将全部流失）。 3.3 衍生化：同GB/T5009.191-2004 4 测定方法 4.1色谱、质谱条件 GC条件: DB-5MS毛细管柱（30m×0.25mm×0.30μm），进样口温度：280℃；进样：1μl，不分流进样； 程序升温条件：；载气流量：氦气，恒压模式，10psi（定量时用程序流量，）。 全扫描MS条件：电子倍增器偏离：＋100V，灯丝电流：25μA，离子化方式：EI，70eV；溶剂延迟：10min；target TIC：650000，max ioniation：65000μsec，prescan ionization time：100μsec，background mass：70m/z，RF Dump Value：650m/z，阱温度：220℃，传输线：250℃，manifold：48℃，全扫描质量数范围：m/z70~300（对于1,3-DCP，2,3-DCP，d5－1,3-DCP），m/z70~460（对于d5－3-MCPD、3-MCPD）， 扫描时间：0.63sec/ scan，质谱采集时间为12~18 min。 定量分析MS条件：电子倍增器偏离：＋150V，灯丝电流：50μA，其余参数同定性分析，离子制备如下： 扫描时间段 质量数范围 扫描时间 片断1（d5-1,3-DCP，1,3-DCP）： 10~12min m/z70～285 0.53sec/ scan 片断2(2,3-DCP)：