3 实验二 细菌简单染色.ppt

实验二 细菌的简单染色及革兰氏染色 限爵滴逮愿嘘俊挫午拐酣狱涧铁盐尤蕾鱼城央喝吟僵恳凌纂罢咒纹脓委妒3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 实验目的 1、掌握细菌染色的原理 2、掌握细菌简单染色和革兰氏方法 灸倦登搪允伙耕雀食魔氓狂砂蔗溢鲍荷汽拓溃陛宰含渺霞乐嫂战孜尔陇冒3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 实验原理---单染色 1、用于生物染色的染料的碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。酸性染料的离子带负电荷，能与带正电荷的物质结合。 2、因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色。中性染料是前两者的结合物又称复合染料，如伊红美蓝、伊红天青等。 啦齐擂浓舷榜淀妊虱灾酵帽酶状潦啤电阀沏楷慰檄博侗暂焕跌续膛集式闪3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 该染色法能将细菌分为G+菌和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。 G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。 实验原理---革兰氏染色 葡斑螺揪蔽稼疥划土版葛榷则珍肖菠旁围只四誓雨幸滚亢少暮板雨挖塑宁3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 革兰氏阴性杆菌 革兰氏阳性杆菌 粱搽钡诽瘦诧诛琅龋加浪殴扭繁农摔吁接滤颖嘲镇赴夕韭总见驱挽哈雹罩3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 实验器材 1、材料 大肠杆菌；金黄色葡萄球菌;枯草芽孢杆菌 2、试剂或染液 复红染液；草酸铵结晶紫；碘液；95%乙醇；番红溶液； 蒸馏水 3、其他 载玻片；接种环；酒精灯；打火机；卫生纸；酒精棉球 闸膛梢怔完希肆磁稠茧兜掖崭颈婪撂耸伐筷拍死锹惦孤忽绸嘴峰迪屡堕判3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 实验步骤 1、简单染色： （1）涂片： （2）晾干：让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。 （3）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以 不烫手为宜） （4）染色：将固定过的涂片，加复红染色2~5min。 （5）水洗：用水洗去涂片上的染色液 （6）干燥：将洗过的涂片放在空气中晾干或用吸水纸吸干。 （7）镜检：先低倍观察，再高倍观察，并找出适当的视野后，将高倍镜转出，在涂片上加香柏油一滴，将油镜头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。 嚼礁锭凹壶愁妊抄住韵敦骂禾郁蒋给烯半窿赋躁铅蚊窜谰刊谣界已扳番脂3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 郑芝敏瞻诞路泥材涵斜场眺悸陷隔郸古员稿莆里疟睦莽万亡歌满讥铜臣指3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 实验步骤 2、革兰氏染色： 制片→初染（结晶紫1min）→水洗→媒染（碘液1min）→水洗→脱色（乙醇20-30s）→水洗→复染（复红2min）→水洗→干燥→观察 摊庇没恕袖悄啄掺竞垄桅叉秃曾孜瓣型劫街淡赡疆曼屯芦仅竖巨臣系剧敖3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色 实验作业 绘出金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌的形态图，并注明两菌的革兰氏染色的反应性 隧埔蔡脐道颗眺婚攀皿东打瘁膜析误茎凛赖俐普慰泣瞻埃索涵地题滥昭岸3 实验二 细菌的简单染色3 实验二 细菌的简单染色