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实验7菠菜色素提取与色素分离
实验7菠菜色素的提取和色素分离 (6学时)
一、实验目的
了解薄层层析和柱层析的原理和操作
二、反应原理
绿色植物如菠菜含有多种天然色素,其中胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和b等以极性逐渐增加:
在薄层层析时,上述化合物的展开速度不同;
在柱层析时,流出速度有差异,可被极性不同的溶剂洗脱。
三、主要试剂与仪器
甲醇、石油醚(60~90oC)、无水硫酸钠、丙酮、乙酸乙酯、滴管
剪刀、布氏漏斗、抽滤瓶、分液漏斗、量筒、三角瓶、圆底烧瓶、常压蒸馏装置、硅胶薄层层析板、薄层层析缸、150~160目中性氧化铝
四、实验步骤
1、菠菜色素的提取
用分液漏斗洗涤时,旋荡要轻,以防乳化。
2、薄层层析
点样于距离下边缘约1cm处;
点样要轻,以免刺破硅胶层;
薄层板在展开剂展开后,测量并记录溶剂前沿和每个斑点中心与原点中心的距离。
按公式
计算胡萝卜素、叶黄素、叶绿素的Rf值
3、柱层析
可用滴管代替滴液漏斗滴加洗脱剂
4、最好结果的薄层板、柱层析的所有单独接收组分上交。
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