酪氨酰－DNA 磷酸二酯酶1在非小细胞肺癌中的表达.pdfVIP

l706 · 广东医学 2015年6月 第36卷第 11期 GuangdongMedicalJournalJun．2015，Vo1．36，No．11 · 25(4)：372～375． sodepsychosis[J]．PsychiatryRes，2003，119(1／2)：167— [21]BOKSMP，LIDDLEPF，RUSSOS，eta1．Influenceofantipsy— 170． choticagentsOilneurologicalsoftsignsanddyskinesiainfirstepi— (收稿 日期：2015—02—06 编辑 ：庄晓文) 酪氨酰 一DNA磷酸二酯酶 1在非小细胞肺癌中的 表达水 吴志诚 ，曾冬华，张 自翔 赣南医学院第一附属医院心胸外科(江西赣州 341000) 摘【要】 目的 研究酪氨酰一DNA磷酸二酯酶1(TDP1)在非小细胞肺癌组织中的表达水平，探讨其与肺癌 进展的关系。方法 运用免疫组化和 RT—PCR法检测肺癌根治术患者肺癌组织和癌旁组织中TDP1及其mRAN 的表达水平。结果 TDP1在非小细胞肺癌组织表达水平高于癌旁组织，差异有统计学意义(P0．01)；TDPI mRNA在非小细胞肺癌组织表达水平高于癌旁组织，差异有统计学意义 (P0．01)。结论 TDP1参与了非小细 胞肺癌的发生和发展。 【关键词】 非小细胞肺癌；酪氨酰一DNA磷酸二酯酶 1；免疫组化 研究表明，拓扑异构酶 I(TOPI)是直接控制癌 织中TDP1的相对表达。镜下细胞核有棕黄色颗粒沉 细胞生死存亡 的关键酶 ，在癌变细胞 中，高活性 的 着，且染色明显高于背景判断为阳性表达细胞，判定标 TOPI可以保证高程度的DNA超负螺旋，也就保证 了 准参考文献 [2]，高倍镜下利用软件计算 阳性细胞所 占 癌细胞的疯狂增殖中基因序列的复制，这在癌细胞的 比例，将阳性细胞的百分率数值进行半定量分级：5％ 高度无限制增殖过程 中起关键作用 。酪氨酰 一 为0分，阴性；5％ ～50％为2分 ，弱阳性 (+)；51％ ～ DNA磷酸二酯酶 1(TDP1)是处理加工 TOPI的关键 74％为3分，中度 阳性 (++)；≥75％为 4分，强阳性 酶，TDP1在肺部肿瘤生长发展中扮演怎样的角色，是 (+++)。(++)及以上为阳性表达。阳性表达率 = 否在肺癌组织 中有高表达，目前国内外 尚未见相关 的 阳性表达样本数量／总样本数量 ×100％。 研究报道 。因此 ，本研究拟通过分子生物学手段来研 1．3．2 RT—PCR检测 TDP1mRNA 的表达 总 RNA 究TDP1在肺部肿瘤发展过程中的表达情况，力求为 提取的实验步骤 ，按 Trizol法的要求严格进行，其 中 肺部肿瘤的特异治疗提供一个新的有效治疗靶点。 TDP1引物序列引用国外文献 ，内参选用 GAPDH，引 1 资料与方法 物序列见表 1，两对引物均 由上海卓康生物科技有限 1．1 一般资料 本研究样本均来源于 2009年 11月 公司合成。经历逆转录、扩增 、电泳等步骤 ，最后用凝 至2010年8月在我科行肺癌根治术患者，选取90例。 胶 自动成像分析系统观察结果 ，并分析 目的片段扩增 其中男63例，女27例 ；年龄≤60岁32例 ，年龄 60岁 带和 GAPDH扩增带 的光密度值，以TDP1／GAPDH光 58例 ；鳞癌 65例，腺癌25例；高分化癌29例，中分化 密度比值来表示TDP1mRNA的相对表达水平 ，琼脂糖 癌 36例，低分化癌25例 ；TNM分期 (UICC2009分期 电泳 以100bpDNALadderV(天根生物公司)的相对 标准)：I期22例，Ⅱ期45例，Ⅲ期23例，无淋巴结局 分子量为标准 ，实验各组 RT—PCR扩增 的TDP1及 部转移(N1)『的23例，有淋巴结转移的其 中N 期的32 G