THP一1巨噬细胞源性泡沫细胞模型的建立及鉴定.PDFVIP

中药新药与临床药理2009年 旦笙 查箜 塑 ·281· · 方 法 学 研 究 · THP一1巨噬细胞源性泡沫细胞模型的建立及鉴定 王术玲，潘华新，王培训 (广州中医药大学，广州 5104O5) 摘要：目的 以人类单核细胞株 THP一1建立泡沫细胞模型及建立鉴定模型的方法。方法 以160nmol／L的佛 波酯诱导THP—l24h后分化成为巨噬细胞，继与80mg／L的氧化型低密度脂蛋 白孵育48h，油红 0染色后显 微镜下观察细胞形态，采用 HPLC—MS的方法测定细胞 内胆 固醇和胆 固醇酯的含量。结果 经油红 0染色 后，诱导建模的细胞 内有大量的红色脂质颗粒存在；HPLc—Ms测定结果显示，与正常单核细胞相比，建模的 细胞 内胆固醇和胆固醇酯含量均明显增加。结论 THP一1细胞经佛波酯和氧化型低密度脂蛋 白诱导后，能成 功建立人类巨噬细胞源性泡沫细胞模型。 关键词 ：THP一1细胞 ；泡沫细胞模型 ；油红 0染色；HPLC—MS法 中图分类号：R285．5 文献标识码 ：A 文章编号：1003—9783(2009)03—0281—04 EstablishmentandIdentificationfl0rM acrophage—derivedFo锄 CellM odelofTHP 一1CeIlLine WANGShuling，PANHuaxin，WANGPeixun(Guangzh0uuniversityofChinesemedieine，Guangzh0u510405，China) Abstract：objlective Toestablishamacrophage—derivedf0amcel1m0de10fhumanmonocyticTHP一1celllineandto identifvthef0am cel1．Methods THP一1cellswerediff．erentiatedintomaemphagesafterinductionwith160nm0l／L ph0rbol一1一myristate一13一acetatefbr24 hoursand thenincubationwith 8Omg／L oxidized l0w densitylip0pI0ltein (oxLDL)for48hours．Thedifflerentiatedcellswereobsenedafter0ilI．edOstainingunderlightmicI．0scope．Highper{0．r— manceliqui(1(I1‘rflmat0graphy／atmosphericpressurechemicali0nizationtandem massspectmmetry (HPLC—MS)was usedfnlrquaI1lilaIiveana1ysis0fcelluIarch0lesterolandcholesterylestersc0ntents．Results Therewasalargenumberof red1ipiddropJetsinph0rb0l—l—mvristate一13一acetateandoxLDLtreatedTHP—lcellsafter0ilIdO stainingunder lightmicr0sc0pe．Cellularcontentsofch0lesterolandcholesteIvlestersinthediffleI．entiatedcellsincreasedmarkedlycom． DaredwiththenorrnalTHP一1mon0cytesbyHPLC—MSassay．COnclusiOn A humanmonocyte—derived f0am cell m0delhasbeenestablishedbyincubatingTHP一1cellswith120nmol／Lph0rbol—l—mvristate一13一acetatef0r24and thenwith80mg／Loxidizedl0wdensitvlipopI．0teinf0r48hours． KeVwOrds：THP一1cel1line；F0am cel1model；OilredO；HPLC—MS 在动脉粥样硬化 (Athemsclemsis，As)发展过程 1一myristate一13一acetate，PMA)诱导分化为巨噬细 中，泡沫细胞 的形成是早期关键