基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型.PDFVIP

4·76 · Chin J No socomiol Vol . 15 No . 4 2005 ·论 　著 · 基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型 黄 　庆 , 府伟灵 , 周 　玉 , 张 　雪 , 黄君富 , 陈　斌 (第三军医大学西南医院 , 重庆 400038) 摘要 : 目的　针对 H PV DN A 亚型的异质性 ,建立 H PV DN A 亚型的基因芯片快速检测方法 ,为 H PV 感染病例 ( 提供诊断依据 。方法 　18 种 H PV DN A 亚型 H PV6 、16 、18 、3 1 、33 、35 、39 、11 、45 、51 、52 、53 、56 、58 、42 、59 、66 、 68) 特异性探针 ,固定于硝酸纤维素膜制备成基因芯片 ,生物素标记引物经通用引物介导 PCR ( GDPCR) 扩增 H PV DN A , PCR 产物与基因芯片经反向点杂交检测 H PV 亚型 ; 同时采用荧光定量 PCR 检测 H PV6 、11 、16 和 18 亚型 。结果 　3 1 例标本 中 , 基 因芯片 的阳性检 出率为 742 % , 其 中 H PV6/ 18 、H PV 11/ 16 、H PV33/ 58 和 ( ) H PV6/ 11/ 33 多重感染各 1 例 32 % ; 荧光定量 PCR 阳性检出率为 677 % , 与前种方法相 比较 , 漏诊率为 65 % 。结论 　H PV 分型基因芯片可 1 次检测 H PV 多种亚型 ,灵敏度高和特异性强 ,有利于对 H PV 多重感染的 诊断 。 关键词 : H PV ; 基因芯片 ; GDPCR ; 反向点杂交 中图分类号 : R373 1 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : (2005) Rapid Detection and Classif ication of HPV Genotype with Genechips HU AN G Qing , FU Weiling , ZHOU Yu , ZHAN G Xue , HU AN G J unf u , C H EN Bin ( S out hw es t H osp i t al , t he T hi r d M i l i t a ry M e d ical Uni ve rs i ty , Chong qi ng 400038 , Chi na) Abstract : OBJECTIVE To est abli sh genechip s rapidly det ecting different genot yp e of human p apillomaviru s ( H PV) in or der to p rovide valuable laboratory dat a for t he H PV diagno si s. METHODS Genechip s con st ruct ed wit h p robes t ar geting 18 different genot yp es of H PV were immobilized on nit rocellulo se . General p rimer mediat ed PCR u sing biotin labeled p rimer s wa s u sed to amp lify t he H PV DN A and t hen it was u sed