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总胆固醇测定
化验室标准操作规程
编号:zml—jyk—xm--010
总胆固醇的测定(终点法)
第 1 页 共 3 页
起草人
庄红梅
起草日期
2005.10
生效日期
2005.11
审核人
张庆芳
审核日期
2005.10
颁布后重审日期
2005.11
批准人
许清泉
批准日期
2005.10
颁布部门
检验科
颁布部门
走马岭中心卫生院
总胆固醇的测定
1.原理:
胆固醇酯+H2O 胆固醇酯酶 胆固醇+游离脂肪酸
胆固醇+O2 胆固醇氧化酶 胆甾烯酮+H2O2
2H2O2 +4—氨基安替比林+酚 过氧化物酶 醌亚胺 +4H2O
2.标本采集与处理:
2.1受检者准备:病人必须空腹12小时,不饮酒24小时后采集血样。
2.2静脉采血:除非是卧床的病人,一般采血取坐位,(在抽血前至少应静坐5min)从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带;
2.3抗凝剂:多用血清作血脂分析。如用血浆,就用肝素钠抗凝;
2.4标本处理:室温下放置30-45min离心,放置时间不得超过3h。分离出血清,如当天不能测定,可暂存4℃冰箱可稳定4天。
2.5标本拒收:标本应无溶血。如不符合应重新采集标本.
2.6采血管要求:采血时要求使用一次性无菌注射器,一人一管,用后毁形,用500mg/L有效氯浸泡消毒30分钟,回收、焚烧、做好登记。
3.试剂:
3.1试剂组成:
RⅠ: 胆固醇酯酶 ≧1.141u/ml
胆固醇氧化酶 ≧0.8u/ml
过氧化物酶 ≧6u/ml
RⅡ: 磷酸缓冲液(PH7.7 ) 0.1mmol/L
酚 3.5mmol/L
4—氨基安替比林 0.5mmol/L
化验室标准操作规程
编号:zml—jyk—xm--010
总胆固醇的测定(终点法)
第 2 页 共 3 页
起草人
庄红梅
起草日期
2005.10
生效日期
2005.11
审核人
张庆芳
审核日期
2005.10
颁布后重审日期
2005.11
批准人
许清泉
批准日期
2005.10
颁布部门
检验科
颁布部门
走马岭中心卫生院
3.2标准液: 5.19 mmol/L
3.3质控血清:应在测量未知样本的同时检测质控物并确保质控在可接受的范围内,并且结果必须在三个标准差范围内。
3.3.1质控品批号及范围:批号022431,范围*±2st和*±3s。
3.3.2保存环境:在2—8℃保存,有效期内稳定。
3.3.3质控物保存:
3.4试剂的贮存与稳定性:
试剂在2—8℃保存,有效期内稳定。工作液在2—8℃保存稳定30天。
4.仪器: 上海迅达公司的半自动生化分析仪XD811。
5.操作程序:
5.1分析参数:
方法:终点法 波长: 500nm
温度: 37℃ 比色杯光径:1cm
5.2操作步骤:
质控管
空白管
标准管
样品管
工作液
1.0ml
1.0ml
1.0ml
1.0ml
蒸馏水
——
10ul
——
——
标准液
——
——
10ul
——
样品
——
——
——
10ul
质控品
10ul
——
——
——
分别混匀后,在37℃保温6分钟,测定各管吸光度
6.计算方法:
CHOL=A测定/A标准×定标血清浓度
7.操作性能:线性范围12.93mmol/L,含量过高,用生理盐水稀释后样品、重测,结果乘以稀释倍数。
8.参考值: 5.17—6.46mmol/L
9.结果审核:
9.1室内质控结果的判断:对质控结果进行分析是否在控。
9.2对检验结果进行审核,包括检验项目是否漏项,打印是否清楚。
化验室标准操作规程
编号:zml—jyk—xm--010
总胆固醇的测定(终点法)
第 3 页 共 3 页
起草人
庄红梅
起草日期
2005.10
生效日期
2005.11
审核人
张庆芳
审核日期
2005.10
颁布后重审日期
2005.11
批准人
许清泉
批准日期
2005.10
颁布部门
颁布部门
走马岭中心卫生院
10.临床意义:
动脉硬化、肾病综合症、黄疸、重症糖尿病
恶性贫血、溶血性贫血、甲状腺机能亢进、急性感染、营养不良。
11.参考文献:全国临床检验操作规程 中华人民共和国卫生部医政司
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