原创力文档- 1、本文档共10页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
实验八 细胞内溶酶体与线粒体荧光标记
细胞内溶酶体 和线粒体的荧光活体染色;实验原理;实验原理;1.实验目的 ;Lyso-Tracker Red工作液的配制： ;2. 溶酶体的荧光标记：
a. 去除细胞培养液，加入步骤1配制好的并28℃预温育的Lyso-Tracker Red染色工作液，与细胞28℃共孵育30分钟。
b. 去除Lyso-Tracker Red染色工作液，加入500微升预温的新鲜的细胞培养液或PBS漂洗。
c. 取出盖玻片，在载玻片上滴一滴PBS，将盖玻片反扣在载玻片上，荧光观察
d. 用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到溶酶体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳，可以提高Lyso-Tracker Red染色工作液中Lyso-Tracker Red的浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。;使用说明： ;2. Mito-Tracker Green工作液的配制：
a. 取少量1mM Mito-Tracker Green储存液按照1:5000-1:50000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的
HBSS)中，使最终浓度为20-200nM??例如取1μl Mito-Tracker Green加入到50ml或5ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中。混匀后即为Mito-Tracker Green工作液。HBSS with Ca2+ Mg2+ (C0219) 可以向碧云天订购。;;1 打开可将光和激发光光源（预热10分钟）
2遮光板遮住激发光
3 选择“1”，在可见光下，聚焦，观察清晰图像，再调到高倍镜下，微调至清晰
4 关掉可见光光源，打开遮光板，让激发光透过
5 选择“G”观察红色荧光
6 选择“B”观察绿色荧光
文档评论（0）